иммунохимический анализ белков сыворотки крови и мочи

Автореферат и диссертация по медицине (14.00.29) на тему: Клиническое значение иммунохимического анализа белков сыворотки крови

Автореферат диссертации по медицине на тему Клиническое значение иммунохимического анализа белков сыворотки крови

»-МЕДИЦИНСКИЙ ЦЕНТР УПРАВЛЕНИЯ ДЕЛАМИ ^ ПРЕЗИДЕНТА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

На правах рукописи

РЕЗНИКОВ Юрий Петрович

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ИММУНОХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА БЕЛКОВ СЫВОРОТКИ КРОВИ

14.00.29 — гематология и переливание крови 14.00.30 — аллергология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Работа выполнена в лаборатории клинической иммунологии ордена Трудового Красного Знамени Центральной клинической больницы Медицинского центра Управления делами Президента Российской Федерации и отделе клинической иммунологии НИИ детской гематологии Минздрава Российской Федерации.

Научный консультант академик РАЕН, доктор медицинских наук, профессор А. Г. РУМЯНЦЕВ

доктор биологических наук, профессор В. А. АЛЁШКИН

доктор медицинских наук, профессор Н. Е. АНДРЕЕВА

академик РАМН, доктор медицинских наук, профессор К. П. КАШКИН

Российский государственный медицинский университет

Защита состоится . 1997 г. в часов

на заседании специалицированного Совета Д.084.64.01 НИИ детской гематологии Минздрава Российской Федерации по адресу: 117513, Москва, Ленинский проспект, дом 117.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института детской гематологии Минздрава РФ.

Автореферат разослан «Л..» . 1997 г.

Ученый секретарь специализированного Совета доктор медицинских наук С. Г. ОСИПОВ

АГ (Ag) — антиген АГГ — агаммаглобулинемия

alAT, alAXT — альфа-1 антитрипсин, антихимотрипсин

alКГ — альфа-1 кислый гликопротеин

а2М — альфа-2 макроглобулин

АФ — анафилатоксины (СЗа, С4а, С5а)

ß2M, ß2rn — бета-2 микроглобулин и бета-2 гликопротеин

БОФ — белки острой фазы

ВГА(В) — вирусный гепатит А(В)

ВИЧ — вирус иммунодефицита человека

ГГ, ГП — гаптоглобин и гемопексин

ИаИТ — интер-альфа ингибитор трипсина

ИП — ингибиторы протеаз

ИРМА — иммунорадиометрический метод

ИС — иммунная система, ИД — иммунодефицит

ИФА, ИХА иммуноферментный, иммунохимический анализы

КонА — конканавалин А

ЛИА (LIA) — люминесцентный иммунохимический анализ

МкАТ — моноклональные антитела

ОВИД — общий вариабельный иммунодефицит

ПСШ — полистирольный шарик

РИА (RIA) -радиоиммунологический анализ

РИД — радиальная иммунодиффузия

С — комплементарные белки: Cl инактиватор (С1ИА), СЗ активатор СЗАК и т. д.

(С)ЛЦ — (свободная) лёгкая цепь иммуноглобулинов ТКИД — тяжелый комбинированный иммунодефицит ТФ — трансферрин

Т-лф — Т-лимфоциты: Т-хелперы (индукторы)-Тх, Т-супрессоры (Тс)

Ig(g), o-IgG, c-IgG — иммуноглобулин(ы), общий и субклассы IgG

CA — карбогидратный, CEA — карциноэмбриональный антигены

Н, ЬэеД- тяжелая и легкие цепи иммуноглобулинов

HBs, НВс — поверхностный и ядерный антигены вируса гепатита В

PSA, tPSA, fPSA — простатический специфический антиген, общий,

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

Актуальность проблемы. Белки занимают самое большое место среди всех составных частей сухого остатка плазмы : 60-80 г/л. Их физиологическая роль весьма разнообразна: поддержание вязкости крови и коллоидно-осмотического давления, уровней катионов и постоянного рН, осуществление транспорта ионов, жиров, гормонов, витаминов, лекарств и др., участие в свёртывании крови и, наконец, в защитных реакциях организма (Й.Тодоров,1968. Buffone, 1978, В.К. Кухта,1986). Центральные позиции среди этих реакций занимают иммунные, протекающие с участием Igg (Р.В.Петров, 1982, К.П.Каш-кин. 3.0. Караев, 1983, Р.М.Хаитов.Б.В.Пинегин, Х.И.Истамов. 1995, Л.В.Ковальчук. А.Н.Чередеев,1995). Именно свойства их фрагментов -СЛЦ — легли в основу диагностики одного из вариантов опухолей ИС — болезни Бенс-Джонса, описанной 150 лет назад. Функциональные свойства Igg весьма разнообразны: по данным М. Kazatchkine (1996), препараты плазмы крови, приготовленные на основе Igg, обладая иммунокорригирующим действием, блокируют Fc рецепторы и ослабляют С-зависимое повреждение ткани, укрепляют структуру и растворимость ИК, индуцируют противовоспалительное действие щто-кинов, нейтрализуют микробные токсины и патологические аутоанти-тела путём антиидиотипического взаимодействия, контролируют спектр AT. модулируют продукцию цитокинов моноцитами и Т-лф, активируют или подавляют клоны В-лф. Это обуславливает важность адекватной клинической оценки иммуноглобулинсинтетической функции. Известно изменение этой функции в онтогенезе, между тем. в клинической практике почти не учитываются возрастные нормы Igg: используют либо усреднённые их значения, либо нормы селективных возрастных категорий (Tietz.1990). Актуальность выбора препарата y-глобулина объясняется тем. что фирмы-производители, в первую очередь, обращают внимание на титры AT той или иной специфичности. Однако хорошо известно, что резистентность организма определяется и субклассовой принадлежностью присутствующих в циркуляции AT: принадлежащие IgG2, уровень которых свидетельствует о степени зрелости антителосинтетической функции организма, не могут быть заменены AT той же специфичности, но принадлежащие к другим c-IgG (Hamilton.1989).

Актуальна для клиницистов и оценка динамики отдельных фраг-

ментов появляющихся либо вследствие естественного катаболизма последних, либо формирующегося патологического процесса, прежде всего, онкологического. Природа МкАТ к настоящему времени хорошо изучена, существенный вклад в их типирование и диагностику опухолей ИС сделали Л.И.Яворковский, Е.В.Чернохвостова, Н.Е.Андреева и их сотрудники. Однако, с появлением автоматизированных и, прежде всего, нефелометрических методов исследования, вновь возникли проблемы с идентификацией некоторых миеломных белков. Установить природу естественных антиглобулиновых факторов — агглюти-наторов, Р-белков — на уровне с-да представляется актуальным, в связи с доказанностью их участия в ряде патологических процессов (А.Я.Кульберг, 1978,1996). Важным с практической точки зрения остаётся изучение циркуляции СЛЦ обнаружение их в моче в виде белков Бенс-Джонса давно используется для диагностики миеломы, но их поведение в крови плохо изучено из-за отсутствия достаточно чувствительных и простых методов их идентификации. Внедрение в практику РИА и альтернативных ему методов позволило наряду с детекцией многих клинически важных гормонов и белков разработать методы определения другого родственного ^ белка — |32М, однако, создание подобной тест-системы для идентификации СЛЦ оставалось открытым из-за насыщенности сыворотки крови белками, дающими перекрёстные реакции с СЛЦ (Г. И. Абелев, Э. Р.Карамова, 1982).

Несмотря на то, что большинство белков сыворотки являются филогенетически более древними образованиями, чем Igg. их детальный клинический анализ развернулся лишь в последние годы, благодаря возможности иммунохимической идентификации этих белков в массе глобулиновых фракций (В. А. Алёшкин, А.Г. Лютов, 1986. Л.И.Новикова. 1990, Л.В.Козлов,1992). Установлено, что а1КГ принимает участие в процессах воспаления, ИП активно вмешиваются в функционирование ИС, способствуют развитию опухолевых и деструктивных процессов в организме. В результате активации С — главного эффекторного звена гуморального иммунитета — могут произойти события, схожие с ^-опосредованными реакциями. Интерес к транспортным белкам обусловлен способностью их усиливать резистентность организма, в частности, к бактериальным агентам. Именно поэтому весьма перспективен комплексный клинический контроль за белками крови.

Широкий клинический анализ вышеперечисленных белков с учетом их нормального возрастного распределения в крови стал возможным

благодаря сужению спектра и унификации используемых в клинике им-мунохимических методов. Более чёткое выделение зон безусловно патологических значений актуально для принятия конкретных решений по лечению больного. Актуальность тщательного анализа белковых препаратов обусловлена потенциальной опасностью инфицирования реципиента трансмиссивными вирусными инфекциями.

Целесообразность выбора клинических моделей для оценки информативности ключевых белков крови основывалась на ожидаемых наиболее существенных сдвигах в белковом обмене: при нормальной и осложнённой беременности, иммунодефицитах гуморального звена иммунитета, патологии почек, иммунотропных вирусных инфекциях, некоторых видах опухолей, включая и опухоли иммунной системы.

Эти положения легли в основу разработки и внедрения в практику специальной программы «Иммунологический профиль», предназначенной для унификации сопоставления анализируемых белков с динамикой основных иммунологических показателей, и определения частоты встречаемости диспрогеинемий.

Целью настоящего исследования является разработка, апробация и внедрение в практику унифицированного комплекса иммунохимичес-ких тестов, незаменимых для достоверного определения возрастной динамики и оценки информационной значимости при патологии, ассоциированной с нарушением синтеза или обмена ключевых белков крови.

1. Провести анализ информативности и выбор оптимального спектра иммунохимических методов тестирования белков сыворотки крови в норме и патологии.

2. Оценить возрастную динамику ключевых белков сыворотки крови и определить частоту регистрации безусловно патологических концентраций среди контингента многопрофильного медицинского центра.

3. Изучить динамику сывороточных белков при диспротеинемиях и парапротеинемиях с целью выявления прогностически информативных значений.

4. Разработать иммунорадиометрический метод определения свободных легких цепей (СЛЦ) иммуноглобулинов в сыворотке кро-

5. Провести иммунохимический анализ (ИХА) и оценить качественный состав коммерческих белковых препаратов плазмы для обоснования дифференцированного выбора при заместительной и иммунокор-ригирующей терапии.

6. Разработать и внедрить в практику компьютерную программу «Иммунологический профиль» для диагностики и длительного монито-рирования пациентов с нарушением обмена белков крови.

7. Представить рекомендации для практического здравоохранения и медицинской промышленности по внедрению наиболее перспективных методов ИХА в клиническую практику.

Научная новизна. Впервые в России и СНГ разработана и внедрена комплексная программа ИХА для оценки белков крови с учетом возрастных изменений.

разработаны возрастные нормограммы уровней 20 белков крови, включающих С. ИП, транспортные и другие.

Разработана и внедрена в практику компьютерная программа «Иммунологический профиль» для диагностики и мониторинга больных с патологией белкового обмена. С помощью программы установлена частота встречаемости гиперпродукции и дефицитов основных сывороточных белков среди контингента крупного многопрофильного медицинского объединения. Оценка корреляционных связей между динамикой сывороточных белков позволила идентифицировать конституционный тип белково-синтетической функции организма. Среди исследуемых белков выделены маркёры прогноза течения беременности, Т-лимфот-ропных вирусных инфекций, опухолей, в том числе и иммунной системы. Изучение соотношения онкомаркёров неиммуноглобулиновой природы позволило установить их степень информативности при поиске первичного очага опухоли.

Разработан оригинальный иммунорадиометрический метод определения СЛЦ-А., обладающий высокой специфичностью и чувствительностью. что позволило оценивать концентрацию этих фрагментов lgg в крови, начиная с физиологического уровня.

Показано, что при ряде патологических состояний (нефриты, аллергия и аллергозы. инфаркт миокарда) возможно повышение содержания низкомолекулярных продуктов активации системы комплемента (АФ), способных вызывать клиническую картину высвобождения внут-

риклеточных биологически активных веществ. Впервые предложен тест оценки спонтанного высвобождения С4а, СЗа, С5а в исследуемой плазме для оценки стабильности этих белков в организме. Показано, что ИХА сывороточных белковых компонентов требует особо тщательного подбора лабораторных тестов в связи с возможным проявлением хук-эффекта, невосприимчивости качественных изменений состава Igg, а также недостаточной чувствительности ряда методов для оценки физиологического распределения некоторых белков в крови.

Практическая ценность. Представленные материалы по изучению 20 основных сывороточных белков в возрастном аспекте, анализу главных методических приемов по их изучению, а также компьютерная программа «Иммунологический профиль» позволяют рекомендовать конкретную программу оценки сывороточных белков для любого медицинского учреждения, исходя из его профиля, количества обследуемых и материальных возможностей.

Расчет частоты встречаемости аллергенспецифичных IgE среди обследуемого контингента позволил смоделировать «Русскую аллерго-логическую панель» для in vitro диагностики атопии.

Качественная и количественная оценка состава белковых препаратов крови необходима для подбора наиболее ценных из них для коррекции имеющегося дефекта белкового синтеза.

Результаты ИХА коммерческих препаратов плазмы крови, приведенные в работе, могут быть использованы для научно-обоснованного выбора лечебных и коррегирующих мероприятий.

Внедрение в практику. Результаты исследования используются в работе лаборатории клинической иммунологии Центральной клинической больницы и клинических подразделений Медцентра Управления делами Президента Российской Федерации, лабораториях и клинических отделениях гематологии, иммунологии и онкологии НИИ детской гематологии на базе Республиканской детской больницы Минздрава Российской Федерации, в методике преподавания ординаторам и врачам последипломного обучения Учебно-научного Центра МЦ УД Президента РФ, студентам факультета фундаментальной медицины МГУ.

Результаты исследования доложены на: II Всесоюзном съезде врачей-лаборантов (Москва. 1979), Всесоюзной конференции «Актуальные вопросы иммунологии» (Алма-Ата. 1981), II Всесоюзном симпозиуме «Регуляция иммунного гомеостаза» (Ленинград, 1982). I Всесоюзной конференции «Теоретическая и прикладная инфекционная

иммунология» (Москва, 1982), IV Всесоюзном съезде геронтологов и гериатров (Кишинёв. Киев. 1982), VI Северо-Кавказской конференции по иммунологии, аллергологии и молекулярной биологии (Краснодар. 1983), III Всесоюзном съезде врачей-лаборантов (Москва, 1985), Международном симпозиуме «Микроаналитическая диагностика-86» (Тбилиси, 1986), Всесоюзной конференции «Методология, организация и итоги массовых иммунологических обследований» (Москва, Ангарск. 1987). Дальневосточной конференции «Актуальные проблемы иммунологии. Иммунодефицита и иммунокоррекция» (Владивосток, 1987), XIX Всесоюзном съезде терапевтов (Москва. 1987), VI Всесоюзном съезде дерматологов и венерологов (Челябинск. 1989). I Всесоюзном иммунологическом съезде (Сочи. 1989), Проблемной комиссии Минздрава «Стандартизация медицинских биологических препаратов для профилактики и диагностики инфекционных болезней человека» (Горький, 1990), Конгрессе Европейской Академии Аллергологов и Клинических иммунологов (Цюрих, 1991), I Республиканском съезде иммунологов и аллергологов (Душанбе, 1991), XXII съезде Международного общества по биологии опухолевого роста и медицине (Гронинген, 1995), V Российском съезде специалистов по лабораторной диагностике (Москва, 1995), Международном съезде по иммунореабилитации (Сочи. 1995), III съезде Белорусского научного общества иммунологов и аллергологов (Гродно, 1995), IX Европейской конференции «Прогрессивная технология и биотехнология для клинической лаборатории» (Милан, 1995), XVI Международном Конгрессе по Клинической Химии (Лондон, 1996), III Международном Конгрессе по иммунореабилитации в медицине (Эйлат, Израиль, 1997).

Апробация диссертации проведена 23 июня 1997 г. на совместном заседании НИИ детской гематологии МЗ Российской Федерации, кафедры нефрологии и иммунологии УНЦ и лабораторного центра ЦКБ Медицинского Центра Управления делами Президента Российской Федерации.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 58 работ, получено 1 авторское свидетельство.

Структура работы. Диссертация состоит из введения, 5 глав литературного обзора и собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций. Работа изложена на 345 страницах машинописи. Текст иллюстрирован 59 таблицами. 28 рисунками. 21 выпиской из историй болезни. Библиографический указатель включает 315 литературных источников.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

В работе представлены сведения по исследованию и научному анализу 20 белков крови, проведенные среди контингента многопрофильного медицинского центра в момент ежегодного диспансерного обследования, а также среди пациентов этого центра и отдела иммунопатологии на базе детской республиканской больницы НИИ детской гематологии. Контингент обследуемых включал: 264 практически здоровых лиц, составивших 17 возрастных групп, 116 здоровых беременных женщин, 20 случаев беременности, осложнённой токсикозом и 28 — гестозом; 33 новорожденных, имевших клинико-лабораторные признаки внутриутробного инфицирования. Частота встречаемости гипер-и гипопродукции исследуемых белков оценена среди 89816 образцов сыворотки крови, охарактеризовано ИЗ сывороток, содержащих па-рапротеин. Свободные лёгкие цепи иммуноглобулинов (СЛЦ) и |52М исследованы у 24 доноров, 21 новорождённого в момент рождения, 72 больных миеломой, 23 страдающих различными вариантами иммунодефи-цитов. 13 пациентов с патологией аутоиммунной природы, 11 — острой пневмонией, 11 — вирусным гепатитом В, 67 пациентов с патологией почек, в т.ч. 8 подвергшихся гемодиализу.

На основе анализа 12890 протоколов аллергологического обследования сформирована «русская аллергологическая панель». В работе представлены материалы по её использованию в клинической практике. Анафилатоксины (АФ) исследованы среди 16 доноров, 44 больных с заболеваниями аллергической и аллергоподобной природы, почек, ишемической болезнью сердца, осложненной инфарктом. Исследованы 48 инфицированных ВИЧ, 83 ложнопозитивные по наличию ВИЧ и 10 человек, проявивших «обратную» сероконверсию. Онкомаркёры исследованы среди 259 пациентов. Проведен анализ 137 серий белковых препаратов крови.

Выбор методов иммунохимического анализа осуществлён среди 9 вариантов РИД и нефелометрии, 18 РИА и ИРМА, 24 ИФА, 6 ЛИА отечественного и зарубежного производства.

В основу настоящего исследования положен анализ материалов ИХА более 20 белков сыворотки крови с оценкой их физиологического

распределения в 17 возрастных группах и частоты встречаемости безусловно патологических концентраций среди обследованного контингента.

Подтверждено, что РИД на основе использования антисывороток отечественных предприятий, отличающихся неистощённостью по Ь-це-пям, а фактически направленных к «^эе, позволяет рано идентифицировать СА.-парапротеин, образуя двойное преципитационное кольцо; обнаружено, что такие же кольца могли выявляться при Мае- и Аэе-па-рапротеинемиях. Нефелометрия, оценивая лишь количественное содержание белка, не в состоянии детектировать формирующиеся парапро-теины по их качественному составу. Повышение надёжности нефело-метрического тестирования сывороток на содержание Igg возможно при дополнительном определении в них концентрации и 1£к, а также их соотношения. В результате такого подхода «раскрыты» 52 из 82 сывороток (62%), первоначально расцененных как не содержащие парапротеин.

Наиболее удобным методом для определения с-да является РИД на основе поликлональных моноспецифических АТ, при этом, дефицит ^4 должен быть подтвержден ИФА.

Возможность проявления хук-эффекта в нефелометрии. РИА, ЛИА. ИФА требует их особо тщательного подбора для избежания получения ложноотрицательного результата, при наличии парапротеинов А, М, С. сверхвысоких концентраций ^Е и онкомаркйров неиммуноглобули-новой природы.

Возрастная динамика сыворотки крови.

Исследование 264 практически здоровых лиц в возрасте 0-78 лет (совместно с проф.А.Г.Румянцевым) и 97 беременных здоровых женщин по триместрам беременности и в родах (совместно с проф.Н.Н.Володиным), дало основание установить возрастное распределение 20 сывороточных белков в 17 возрастных группах (табл.1,6)

Минимальные количества да (6,2±0,44 г/л) содержит кровь младенцев в возрасте 1,3-2,5 месяцев, максимальные — в возрасте 18-22 лет (16,б±0.46 г/л, табл.1). Таким образом, максимальное физиологическое снижение ^(3 происходит несколько раньше, а стабилизация уровней — значительно позже (к 23-29 годам), чем это отмечено другими Ше1г. 1990).

Наступление беременности не влияет на уровень в сыворотке, однако во II триместре происходит его некоторое снижение и

N Возраст 1ее IgA

0 0 9,9-17,1 0 -0,06 0 -0.361

1 до 17да 8,6-12.2 0 -0.17 0.42 -1 061

2 17-ЗОдн 5,4- 9.7 0 -0,48 0.35 -1. 231

3 1. 3-2.5м 3.3- 9.1 0,08-0.2 0,38 -1 22|

4 3-6,5мес 4.1- 9,9 0, 04-0, 32 0,38 -1.3 |

5 7-12 мео 3,2-12,8 0.09-0,41 0,35 -0 751

6 1.2-2,6г 4.6-14.6 0, 12-0, 96 0, 61 -1, 811

7 3-4г 8.8-15.4 0,34-1,5 0,82 -1, 58|

8 5-7л 9.7-11,7 0.78-1.86 0,86 -1, 9 1

9 8-ЮЛ 9,4-16,6 0, 94-2. 86 0,59 -2. 011

10 11-13Л 10,5-18,8 0,97-2.33 0,59 -1, 91|

И 14-16Л 9. 7-20, 0 1.41-2.21 0, 34 -3. 2 1

12 18-22Г 12,1-21,2 1,38-3,46 1,05 -2, 69|

13 23-29Л 10. 8-18,2 1.44-3,2 1.12 -2, 56|

14 30-45Л 9,2-19.2 1.59-3,39 0. 965 -2. 12|

15 46-59Л 9,3-19,8 1,37-3,77 1.0 -2, 6 1

16 60-74Г 9,95-19, 1 1,8 -5,32 0.87 -2, 43|

17 >75л 10,0-18.0 1,59-5,27 0.93 -2. 211

, 1-0.4 .6-4,6 . 4-5.2 0-6,3 0-45 0-67 0-30 0-121 0-131 0-240 0-253 0-386

0-246 0-187 0-114 0-148 0-178

0.125 0.43 0.3 0.285 0,39 0,32 ■ 0.29 ■ 0, 665 0,66 • 0,54 ■ 0, 324-0, 29 • 0,34 ■ 0,55 • 0,43 ■ 0,61 ■ 0,74 ■ 0.54 ■

-0,365 -0.89 -0.7 -0. 842 -0,83 -1.0 -1.09 -0. 945 -1.02 -0. 94 -0.785 -0,69 -0,74 -0.91 -0. 79 -1.17 -1,26 1.3

15 -0. 285-0. 225-0, 26 -0. 31 -0. 26 -0. 245-0. 28 -0. 25 -0. 21 -0. 23 -0.

0. 14 -0.24 -О, И -О, 12 -0,19 -О, 15 -О, 13 -0.19 -О, 18 -О, 15 -0. 14 -0.15 -0. 19 -0,24 -0.23 -0. 255-0,24 -0.26 —

0.26 0. 36 0,37 0.36 0.43 0. 44 0,37 0,31 О, 38 0,39 0,26 0.27 О, 35 0.36 0.39 0.47 0.46 0.42

054-0, 13 -0. 057-0, 079-0, 12 -О, 16 -О, 112-0, 144-0, 16 -О, 141-0, 105-0. 086-0, 126-0. 153-0. 108-0, 156-0. 136-0, 147-0.

206 225 179 216 24 264 252 272 249 193 154 202 201 212 252 244 195

53-1,051 62-1.18| 72-1.161 6-3.4 | 75-1,071 64-1.6 I

52-1.281 67-0,991 59-1.071 50-0.941 75-1.151

54-1.061 84-1.321 81-1.291 7 -1,22|

Табл.2. Распределение белков сыворотки крови по триместрам нормально протекавшей беременности и в родах.

1 I Группы ±2Дп-1 Группы ±2Лп-1 Группы i ±2Дп-1 I

от Хер от Хер от Хер I

|1- I ^А 1.29-3.57 1- -I СЗс 0,78 -1,54 1-1 ТФ 2,46 -5,38 |

12- II 1, 32-2,84 2- -II 0. 82 -1,38 2-II 2,91 -5.35 |

13- -III 1. 15-2,95 3- -III 0,93 -1,41 3-III 3,47 -5,87 |

14- Роды 1, 16-3,96 4- -Роды 0,98 -1,78 4-Роды 3,78 -9.38 |

11- I 1§м 1,12-3,8 1- I аши 1,5 -7,3 1-1 ЦП 0.377 -0,7371

12- II 0, 96-3.32 2- II 2,56 -5,56 2-II 0,48 -0.76 |

13- III 1,19-3,35 з- III 2.19 -5, 43 3-III 0,505 -0,825]

14- Роды 0.83-4.43 4- Роды 2.95 -8,95 4-Роды 0,51 -1.03 |

U- I 1ес 9.36-21,24 1- I alAXTO. 396 -0, 876 1-1 ГГ 0.66 -2.98 I

12- II 9.92-15,32 2- II 0.33 -0, 81 2-II 0.11 -2.47 1

13- III 9.1 -14,7 3- III 0.33 -0,81 3-III 0.36 -2.48 |

14- Роды 10.9 -16,9 4- Роды 0.31 -0,91

11- I С1ИА 0.224-0,464 1- -I иаит 0.429-0,829 1-1 гп 0.99 -1,79 |

12- •II 0.201-0,361 2- -II 0,40 -0.76 2-II 1,03 -1,51 I

13- III 0.201-0,361 3- -III 0,43 -0,83 З-Ш 0,98 -1,5 I

14- Роды 0,216-0,416 4- -Роды 0,48 -0. 96 4-Роды 0, 95 -1.75 |

11- I С4 0, 232-0.512 1- I 02 М 2,41 -4,61 1-1 alкг 0.37 -1,37 |

12- II 0, 158-0,518 2- II 2,27 -4.19 2-П 0.36 -0,84 |

13- III 0. 184-0,572 з- -III 2.16 -4. 16 З-Ш 0. 38 -0,74 I

14- Роды 0, 265-0,585 4- Роды 2,08 -4. 88 4-Роды 0. 39 -1.11 1

H- I СЗАК 0,15 -0,27 1- I (ИБР 0,01 -0, 04 1-1 Р2ГП 0.123 -0,2431

12- II 0,14 -0,30 2- II 0.02 -0, 06 2-II 0. 12 -0.2 I

13- III 0,16 -0,28 3- III 0.04 -0,12 З-Ш 0,13 -0.21 I

|4-1 Роды 0,15 -0,35 4- Роды 0.07 -0,21 4-РОДЫ 0,13 -0.25 | i

лишь в момент родов возвращение концентрации к первоначальной

Минимальные, практически следовые, количества IgA в сыворотке крови наблюдались в первые 2-3 недели жизни, на протяжении дальнейшей жизни прослеживалась тенденция роста его концентрации (табл.1), при достижении в терминальный период жизни максимальных уровней. Аналогичную динамику IgA отмечали и другие авторы, однако обнаруженные нами границы распределения физиологических величин IgA, превосходят их данные, по крайней мере, вдвое — по нижней границе и в 1,5 раза — по верхней (Tletz, 1990).

Во время беременности сывороточный IgA снижается уже в I триместре: 1,68±0.15. против 2.32+0,09 г/л у 23-29 летних, р 14,2 г/л) выявлена у 33 пациентов, причем в 15 случаях имела место парапротеинемия: Glae (9) и G1X (6). В 8 случаях ranep-Gl-глобулинемня была изолированной: при Glae-миеломе (3), у двух пациентов с лимфопролиферативным синдромом, у 61-летнего больного с обострением хронического бронхита, пищевой токсикоинфекцией и сниженным уровнем IgA (0,5 г/л), у больного с бронхо-лёгочной патологией и дефектом синтеза IggA и М и у ребенка с хронической гранулематозной болезнью. У ребенка 2,5 лет с цитомегаловирусной инфекцией обнаружен крайне высокий уровень IgGl (33,6) — 90.4% суммы всех c-Igg, однако, при перерасчёте он оказался равным 5.4 г/л. Последний случай заставляет обращать внимание не только на абсолютные уровни c-Igg, но и на их

соотношение, в часности. 1£й1/18(32. В 10 случаях парапротеинемии наблюдали 1яС2-дефицит, причем в 8 случаях изолированный. Это даёт основание предположить, что на стадии угнетения синтеза полик-лональных белков в первую очередь начинал страдать синтез 1ц(32. В трех случаях гиперглобулинемии наблюдался дефицит ^А, причём в одном случае он сочетался и с дефитом а в другом — с ги-

перпродукцией всех с-да.

Дефицит 1яВ1 ( 9,5 г/л) выявлена у 7 пациентов: с дефицитом (2), С2зе-миеломами, первично множественным раком

— правой голосовой связки (оперированной на фоне снижающегося 1§М вследствие, по-видимому, формирующейся С2Х-миеломы). В одном случае развившегося токсического гепатита доброкачественная ги-пер-^-глобулинемия наблюдалась на фоне снижения Тх/Тс 2,28 г/л) наблюдалась в 5-ти случаях, в том числе, при СЗХ-миеломе (до 137 г/л), недифференцированного системного заболевания с гипертермией и деформацией суставов; при

экзогенном аллергическом алызеолите на фоне гипер-IgG, за счёт IgGl и IgG3 и IgM (10,55-7.6 г/л).

Избирательный дефицит IgG3 ( 1,55 г/л) определена у 18 пациентов: в 4х случаях имела место множественная Х-миелома. в 6 случаях — при IgA-дефицитах (при этом только в двух случаях наблюдалось повышенное содержание и других c-IgG). У трёх пациентов гиперпродукция IgG4 сочеталась с гипер-^М-глобулинемией (до 26,4 г/л) на фоне туберкулёза легких, пневмонии, хронического пиелонефрита. диабетического гломерулосклероза. ХПН. сахарного диабета 2 типа, постоянных рецидивирующих инфекций, токсического гепатита. В двух случаях гипер-ад4-глобулинемия сочеталась с ги-nep-IgE-глобулинемией.

Граница, отделяющая дефицитный уровень IgG4. у пациентов с минимальными концентрациями IgG4 в РИД и клиническими признаками ИД, находится ниже 30 мкг/л (по данным ИФА).

Препараты Y-глобулина: тактика выбора.

С целью выбора наиболее оптимального режима заместительной терапии мы проанализировали состав Igg и c-IgG в десяти сериях иммуноглобулина направленного действия отечественного и зарубежного производства. Отечественные препараты К

глобулина, за исключением гистаглобулина, содержали IgA. Хотя преобладающим по составу во всех Y-глобулинах являлся IgG. его концентрация колебалась от 5,4 до 128 г/л. Все анализируемые препараты были обеднены IgG4 и большинство — IgG2. Если снижение процентного содержания IgGl и IgG3 может быть допущено в силу их возможной замены антителами из других c-IgG, то относительный дефицит IgG2 вызывает настороженность. При выборе Y-глобулина для заместительной терапии у пациентов с АГГ предпочтение следует оказывать препаратам, обогащенным IgG2. Именно они наиболее ценны в клинике ИД. Опыт применения одного из них — Интраглобина Ф (Biotest Pharma GmbH, Германия) у больного с поздно проявившейся АГГ и прогрессирующим ухудшением иммунологических показателей свидетельствует, что

адекватную клиническую ремиссию можно поддерживать по достижении концентрации o-IgG в циркуляции не более 2 г/л, т.е. в 5 раз меньше нижней границы нормы. В данном случае ремиссия была достигнута на фоне применения высококачественного препарата К-глобули-на, обогащенного ^С2-фракцией, позволявшей поддерживать соотношение IgG2/IgGl, близкое к 1. В период введения Интраглобина Ф в крови вновь появился IgM, причем в рекордно высокой для этого пациента концентрации — 0.38 г/л (хотя ИХА препарата не выявил этого Ig), отмечена положительная динамика митогенного ответа Т-лф на КонА, что подтверждает иммунорегуляторное воздействие препаратов к-глобулина на организм.

Нестабильность количественного содержания Igg в препаратах К-глобулина. подразумевает и возможность нестабильности титров AT. Исследование 126 серий препаратов к-глобулина подтвердило наличие AT к вирусу гепатита А (анти-ВГА) во всех сериях в титрах 1:10-1:10000. При исследовании препаратов к-глобулина на наличие анти-HBs можно было ожидать, что в К_глобулине из регионов с более широким распространением анти-HBs будут выявляться и более высокие титры AT. Однако, подобной закономерности не отмечалось: эти AT были выявлены (преимущественно, в титре 1:1) лишь в 47% серий препаратов из Узбекистана и. наоборот, при меньшей распространенности анти-HBs среди жителей Москвы все препараты к-глобулина местного производства содержали эти AT в более высоких титрах. По-видимому, недостаточный контроль на HBsAg при отборе крови для приготовления К-глобулина является одной из причин отсутствия или низкого содержания анти-HBs в результате формирования в пуле сывороток иммунных комплексов HBsAg-aHTH-HBs. Наличие во всех сериях к-глобулина анти-НВс в высоких титрах является дополнительным свидетельством их приготовления из HBsAg-контамини-рованной крови. Наличие высоких титров анти-HBs в препаратах К-глобулина может служить протективным фактором для пациентов от заражения ВГВ, однако, успешный отбор доноров возможен при контроле HBsAg РИА или, лучше — полимеразной цепной реакцией (ПЦР).

Композиция «Русской аллергологической панели».

Определение общего и аллергенспецифических IgE в сыворотке более, чем 20 лет, основывалось на классической продукции фирмы Pharmacia (Швеция), разработавшей методы бумажного радиоаллерго-сорбентного теста — ПРИСТ и PACT (Phadebas IgE PRIST/Phadebas

RAST). Вместе с тем, за последние годы стали появляться альтернативные методы исследования общего и аллергенспецифических IgE, стремящиеся избежать недостатков классических: ограниченности диапазона калибровочной кривой (0,5-100 кЕ/л для ПРИСТа), использования бумажной подложки для фиксации анти-IgE антител и 125-1. Мы испытали две новые тест-системы, основанные на ИФА: (1) стационарную, предназначенную для количественного определения IgE в крови и (2) экспресс — полуколичественную.

При испытании новой системы из гр.1 («IgE-ИФА»), дающей возможность исследования уровня IgE в неразведбнных сывороточных образцах, против калибровочной кривой до 1000 ME/мл, уже при концентрации IgE в образце выше 500 ME/мл были получены пародоксаль-ные результаты: существенное увеличение конечной концентрации IgE в сыворотках, разведённых 1:10 и 1:100, по сравнению с результатами исследования цельной сыворотки (хук-эффект). Чувствительность метода оказалась также недостаточной: уровни IgE менее 26 ME/мл не улавливались, следовательно, такой метод не может заменить традиционный.

Тест-система из гр.2 основана на применении тест-полосок для полуколичественного определения общего и аллергенспецифических IgE («duldel», США). При определении o-IgE «хук-эффект» отсутствовал даже на фоне 17320 кЕ/л IgE. Результаты тестирования сывороток хорошо коррелировали с ПРИСТ, однако чувствительность не позволяла выявлять уровни IgE ниже 9 кЕ/л. Данный метод позволяет идентифицировать аллергенспецифичные AT. о наличии которых клиницисты и не подозревают, однако, фиксированный набор аллергенов снижает актуальность многих из них для Российских регионов. Поэтому, совместно с проф. Л.А.Горячкиной и Т.С.Тополевой были проанализированы 12890 протоколов аллергологического обследования, проведённых в лаборатории (PACT) и стационаре (накожные скарифи-кационные и ингаляционные пробы), в результате чего выделены 50 наиболее часто встречаемых или наиболее опасных по последствиям (например, по возможности возникновения анафилактического шока) аллергенов (табл.5).

Предлагаемый ингаляционный набор аллергенов (1) предполагает выявление реагинов к t4, t7, g4, g3, w6, wl5, часто встречаемых в крови пациентов, но отсутствующих на панели Quidel. Поиск наиболее приближенной панели аллергенов среди продукции фирмы Medland

Табл.5.»Русская аллергологическая панель» для in vitro диагностики.

1 1 |Коды аллергенов: | NN наборов: 1 1 1 2 3 4 5 1 6 1

— ежа сборная 11 II w8 11 1 ||e208l Г156 M il НГ53 II 1 1 p2 II 11 шк II

— овсяница луговая II II 1 Il II II II

(еб — тимофеевка II w 15|1eS5 1 Г83 11Г49 II pl II гз 11

|и6 — полынь обыкновенная II II 1 Il II II II

|и8 — одуванчик II w6 1 Ie3 1 Г44 11Г31 1 1 16 II Î2 II

|и15 — лебеда чечевицевидная II II 1 Il II II II

Iьг — ольха серая II g6 1 |шо 1 ГЗЗ 1 1f17 H 13 II и 11

КЗ — бербза белая обыкнов. II II 1 Il II II II

I14 — лещина II g4 1 line 1 f 27 11f12 II И II е85| 1

Ц7 — дуб II II 1 Il II II II

(Г1 — яичный белок II g3 Пик 1 f 26 1I fil 1 1 m6 M еЗ 11

[12 — МОЛОКО II Il 1 Il II II II

из — рыба (треска) II t7 IlКДП 1 f25 11f9 II Ш4 II hl 11

|Г4 — пшеница II Il 1 Il II II II

Н5 — рожь II t4 ИБП 1 f3 11f7 II m3 II w6 II

|Г7 — овес II II 1 II II II II

IГ9 — рис II tz M MI 1 f2 1 1 f 5 II m2 II g6 II

IГ И — гречиха II Il 1 Il II II II

К12 — горох II t3 1 |h2 1 il 11 f 4 II ml II t3 II

IГ17 — лесной орех II II 1 Il II II II

|Г31 — морковь 11 11 г и il 11 1 1

|ТЗЗ — апельсины 1

IГ44 — клубника (земляника) БП- библиотечная пыль КДП — клещи дом|

|Г49 — ЯбЛОКИ hi — бытовая пыль N1 пыли

|Г53 — персик h2 — бытовая пыль N2

IГ83 — мясо курицы ml — плесень пенициллиновая

1Г156— подсолнечник m2 — кладоспориум

|еЗ — перхоть лошади m3 — аспергиллюс

|е85 — куриные перья m4 — мукор рецемосус

|е208- человеческий волос тб — альтернария тенуис

|ШК — шерсть кошки И — яд пчелы

|ШС — шерсть собаки 13 — яд осы pl — аскарида |

|Ш0 — шерсть овцы 1 16 таракан p2 — эхинококк! 1

Systems (Нидерланды) также не увенчался успехом: среди панелей

MAST CLA-1 мы не нашли g4, t2 и t4. В то же время, эти панели включают второстепенные аллергены, что значительно удорожает стоимость обследования. Так, ни одна из мультиаллергенных панелей MAST не включает и половины из 20 наиболее важных пищевых аллергенов из состава «Русской панели» (табл.5, наборы 3.4). Таким образом, предлагаемый спектр наиболее важных для российского населения аллергенов позволяет более эффективно осуществлять диагностику атопии в условиях общеклинической лаборатории и обеспечивает выявление 92% случаев аллергии, сопровождающихся позитивными in vitro реакциями.

Высокий уровень IgE может быть свидетелем развития и неаллергической патологии (М.Н.Ярцев,1992). Вопрос, какими видами патологии могут сопровождаться сверхвысокие уровни IgE. мы изучили среди группы пациентов, у которых уровни IgE превышали 10000 кЕ/л. Среди 7013 обследованных таковых оказалось 24 (0. 34%). Ги-nep-IgE-глобулинемия. по крайней мере, у 6, не была связана с атопией: у 1 пациента была диагносцирована лимфосаркома, у второго — лимфоцитомы с поражением лимфоузлов и кожи и у 4 — гипер-IgE синдром. Остальное большинство случаев составили тяжелый атопи-ческий дерматит, нейродермит, бронхиальная астма, плевропневмония. По разнице уровней IgE до и после лечения, установлено, что гельминтоз может спровоцировать подъём o-IgE максимум на 3000 кЕ/л. Крайне высокие концентрации IgE в крови, с одной стороны, часто сочетаются с дерматологическими клиническими проявлениями заболевания, а с другой — могут выступать как свидетели глубокого иммунологического дисбаланса. Это оправдывает включение в комплекс лечебных мероприятий иммунокорректоров, улучшающих сбалансированность взаимодействия иммунокомпенетных клеток.

Возрастная динамика БОФ сыворотки крови.

Среди ВОФ предметом нашего исследования явились а1КГ, ИП, комплементарные и транспортные белки.

Установлено, что в момент рождения ребёнок имеет минимальную концентрацию alKT (0.245±0,013 г/л) в крови, однако, в течение первых 17 дней жизни она возрастает до сопоставимой со взрослыми (0,65+0.035, Pj_ 14>0,05). Средние значения а1КГ в крови пупочного канатика в 3 раза ниже средних значений этого белка у роженицы (табл.1.2), что послужило основой для мониторирования его прироста с целью диагностики внутриутробного инфицирования [4].

Для исследования возрастного диапазона комплементарных белков нами были отобраны С1ИА, СЗАК, С4, СЗ (СЗс) и, отдельно, изучены низкомолекулярные продукты активации С — АФ. Установлено, что концентрация С1ИА в крови новорожденного относительно низка (0,19±0,004 г/л, р 5 г/л) — в 124 (5,98%). а2М в крови менее 1 г/л обнаружена у 20 (0,99%), а выше 5 г/л — у 51 (2,52%) пациентов. Отметим, что все 4 клинических случая с уровнем а2М ниже 0,86 г/л, ассоциировались с заболеваниями желудочно-кишечного тракта, гиперпродукция а2М (до 8 г/л) в 44% случаев с патологией бронхо-лёгочной системы (обострение хронического бронхита, пневмосклероз, эмфизема легких, острые бронхопневмонии, далее -сепсис и гепатиты, в т.ч. вирусной этиологии. Максимально высокий подъем сывороточного а2М (22,5 г/л) мы наблюдали у ребёнка, с вторичным нефротическим синдромом на фоне дисплазии почек.

Среди транспортных белков изучена возрастная динамика ПреА, А. ТФ. ГГ. ГП.

ПреА исследовали в 12 возрастных группах, оказавшимся одним из наиболее стабильных сывороточных белков: минимальные концент-

Табл.6. Диапазон физиологических концентраций (±2Дп-1 от Хер) ИП и транспортных белков в сыворотке.

1 Возраст 1 а1АХТ а1АТ ИаИТ 02М ■ Р2ГП ТФ 1 1 ЦП — ■ — -гг

|гр г/л г/л г/л г/л г/л г/л 1 г/л г/л I

1 0 0 0.124-0.298 1,93-2, 89 0, 425 -0.577 2,49- -4. 21 0,095-0. 171 2,27-2, 91 |0.074-0,202 0-след|

1 1 ДО 17ДН 0,379-0.679 1.8 -3, 2 0,316- -0,472 3.39- -5, 15 0.045-0, 185 0, 86-2. 3 10. 139-0,347 0-2, 331

1 2 17-30ДН 0. 282-0, 596 1,51-2, 91 0,37- 0,577 3.5 -5. 38 0.118-0, 170 1,13-2, 49 |0, 144-0,368 0-1. 7 1

1 3 1.3-2. 5М 0. 204-0, 496 1,03-2. 59 0. 352- -0, 577 3,69- -4, 77 0.102-0,218 1,1 -з, 34 |0.189-0, 383 0. 43-1. 49|

1 4 3-6.5мес 0,51 -0,706 1.41-3. 01 0.491- -0,663 3.7 -5, 66 0. 120-0. 184 1,62-3. 42 10,237-0,525 0.69-3. 131

1 5 7-12 мес 0.263-0,703 1,7 -2, 86 0,376- -0,656 3,47- -5, 51 0,117-0,,197 2,17-3. 77 10.28 -0,52 0. 69-2, 931

1 6 1.2-2.6Г 0. 279-0. 507 2,17-3, 05 0,318 -0,6 3.33- -5, 27 0,13 -0,121 1,65-4. 09 10,2 -0,524 0,31-3, 111

1 7 3-4г 0,369-0.561 1,96-2, 84 0,53 -0,65 3.6 -5, 1 0,13 -0,21 1.85-2. 85 10,313-0.429 0,74-1, 9 1

1 8 5-7л 0.318-0.598 2,12-3, 68 0,41 -0.81 3.75- -4, 87 0,144-0, 248 2,28-3, 32 10.334-0.514 0,32-2, 321

1 9 8-Юл 0,312-0.515 1,15-3, 31 0,32 -0,76 3.13- -4, 65 0,108-0, 228 2, 22-3, 1 10,3 -0.46 0,4 -1, 64|

|10 11-13Л 0, 339-0, 549 1,32-2, 56 0, 332- -0,984 2,49- -4, 39 0, 135-0,211 2,78-3, 98 10,202-0,414 1,29-2, 85|

111 14-16л 0,22 -0,512 1, 11-2, 39 0.25 -1,055 2.55- -3, 83 0,130-0.206 2, 05-3, 77 10,201-0, 277 1.67-3, 111

112 18-22г 0,364-0,509 2, 34-3. 26 0.46 -0,748 2, 13- -3, 97 0,167-0. 259 1,85-4, 09 10,243-0,375 0, 36-3, 681

113 23-29Л 0.473-0,741 2,09-3, 17 0.47 -0,91 1,99- -з. 19 0, 150-0, 274 2.57-3, 81 10,274-0,418 1,0 -3. 2 1

114 30-45Л 0.316-0.572 1.43-2. 67 0.499- -0.651 1.91- -з. 71 0, 154-0,214 2.21-3, 49 |0.264-0,368 0,61-1. 931

115 46-59Л 0.398-0.706 1,69-2, 57 0. 498- -0.798 1,58- -2, 94 0,159-0,263 1.89-3, 41 |0.267-0.427 0. 61-2. 931

116 60-74Г 0,390-0.726 1.73-2, 79 0, 466- -0,618 1,52- -3. 16 0, 156-0, 252 2. 18-3, 5 10,244-0.378 0,49-3. 411

117 1 >75л 0, 408-0. 720 1.54-2. 74 0,399- -0.539 1,52- -з. 8 0,148-0, 256 2. 07-3, 39 10,252-0, 52 1 1.32-3. 4 1 1

рации отмечались в первые 2.5 месяца жизни (0,076-0,221 г/л), максимальные — в возрасте 18-22 лет (0,309±0.007 г/л).

Альбумин среди обследованных в возрасте 7 мес-29 лет в минимальных концентрациях определяли до 4-летнего возраста, в максимально высоких — у 18-22-летних (52,6±1,0 г/л). По сравнению с данными 71еЪг (1990) наши границы возрастной физиологической нормы сывороточного альбумина оказались более узкими.

Минимальные концентрации ТФ обнаружены в первые недели жизни, максимальные — у 11-13-летних (табл.6). Подробных сведений о возрастном распределении ТФ мы не нашли. Согласно Т1е1г (1990), с возрастом наблюдается лишь рост его концентрации, в то время как мы обнаружили циклическую динамику. Беременность протекает на фоне повышенных концентрация ТФ (6,58±0,31 г/л в родах), а в крови пупочного канатика концентрация ТФ оказалась в 4-14 раз ниже, чем в материнской (табл.2,6).

Минимальные концентрации ЦП в крови были отмечены в момент рождения ребенка (0,138+0,007 г/л), что в среднем в 5.5 раз меньше, чем у рожениц (табл.2,6). Все возрастные колебания ЦП не выходили за пределы 0,2-0,52 г/л, что согласуется с литературными данными Шегг, 1990).

ГГ в крови пупочного канатика присутствовал в следовых количествах, в отличие от данных Т1е1г (1990), находившим, правда сниженным, его у новорожденных. В литературе отсутствуют сведения о возрастных физиологических концентрациях белка, мы же обнаружили его существенную возрастную динамику (табл.6).

ГП исследован лишь в 4 возрастных группах, а также у беременных. У лиц в возрасте 46 лет и старше уровень ГП в сыворотке практически не меняется. В диапазон 0,88-1,49 г/л укладываются все нормальные значения этого белка. У беременных ГП в крови повышается (табл.2). В крови пупочного канатика уровень ГП оказался почти в 5 раз ниже материнского.

Взаимоотношение сывороточных белков в норме и патологии.

Методом линейной регрессии мы впервые проанализировали степень выраженности корреляционных связей возрастной динамики 17 сывороточных белков: А,М,б,Е, 01КГ, С1ИА, СЗс, С4, СЗАК, 0.7 — высокая степень тесноты связи (Л.С. Каминский,1964).

Установлено, что IgA, повышаясь с возрастом в сыворотке, проявляет заметную степень тесноты связи с а1КГ, С4, ТФ. ГГ и высокую — с IgM, IgG, а2М, Р2ГП, IgE. Возрастная динамика IgM проявляет заметную — с а1КГ. ИаИТ, а2М (отрицательную) и ТФ; высокую степень тесноты связи с IgG, £2ГП, ГГ и IgE. Динамика IgG имела заметную корреляционную связь с С1ИА (отрицательную), Р2ГП, ТФ и высокую — с IgE. Концентрация IgE заметно тесно коррелировала с ИаИТ, а2М (-0,55), ß2rn, ГГ и имела сильную корреляционную связь с Igg A.M.G и ТФ.

А1КГ имеет заметную корреляцию с IgA, IgM. Р2ГП, высокую — с СЗс, С4. СЗАК. alAXT, ЦП.

С1ИА проявляет заметную корреляцию с IgG (обратную), СЗс. СЗАК. alAXT. Возрастная динамика СЗс заметно коррелирует с США, С4, Р2ГП; имеет высокую степень корреляции с а1КГ. ЦП. С4 заметно коррелировал с IgA. СЗс. СЗАК; высоко — с а1КГ, alAXT. СЗАК заметно коррелировал с США, С4, alAXT; высоко — с а1КГ, ЦП.

Заметную степень тесноты связи показал г alAXT с США, СЗАК, ЦП. ГГ; высокую — с а1КГ и С4. Возрастная динамика alAT не проявила сколько-нибудь выраженной корреляции ни с одним из анализируемых белков. Возрастная динамика ИоНТ проявила заметную степень тесноты связи с таковой IgM, ß2rn, ТФ и IgE. Все г а2М оказались отрицательными; заметные с IgM, IgE, ß2rn и высокой степени тесноты — с IgA и IgG. Анализ динамики Р2ГП определил заметную связь с IgG, aim, IgE, СЗс, ИаИТ, a2M, ТФ. ГГ и высокую — с IgA и IgM.

Возрастная динамика ТФ заметно тесно коррелировала с Igg A.M.G, Е. ИоМТ, ß2rn, ГГ; ЦП — с alAXT, высоко — с а1КГ. СЗс, СЗАК. ГГ имел заметную возрастную корреляцию с IgA. alAXT, ß2rn, ТФ, IgE и высокую — с IgE.

Максимально тесная отрицательная корреляционная связь обнаружена между возрастными динамиками IgA и а2М (-0.85), положительная (0.87) — в парах IgM/ß2m и СЗАК/ЦП.

Оценка зависимости исследуемых белков от уровня базисного произведена у здоровых женщин I триместра беременности. IgG был выбран как функционально доминирующий. 35 обследуемых женщин (О группа) были разделены на 3 подгруппы: 1(12 человек) — с максимальным содержанием сывороточного IgG, 2(11) — со средними и

3(12) — с минимальными концентрациями

Установлено, что лишь концентрации З^А, С1ИА, С4, СЗАК, а1АХТ и Р2ГП достоверно не отличались по сравнению с 0 группой. В крови здоровых беременных с максимально высоким содержанием да отмечено и более высокое содержание сопоставляемых белков: а1АТ ИаИТ, ТФ. ЦП, ГГ, ГП. Во второй подгруппе беременных, содержавших да в крови на уровне О группы, оказались сниженными 1§М, а1АТ и ИаИТ. По сравнению с первой подгруппой беременных во второй оказались сниженными сывороточные уровни 1яМ, а1КГ. СЗс, сс1АТ, ИаИТ, ТФ. ЦП, ГГ, ГП. В третьей подгруппе, ни один из анализируемых показателей не отличался от уровня соответствующего белка в нулевой группе. Однако, в сравнении с белками первой подгруппы, обнаружены сниженными уровни: 01КГ, а1АТ, ИаИТ, а2М, ПА, ГГ ГП.

Таким образом, установлена прямая связь между уровнем базисного белка — да и анализируемых сывороточных белков, что дает основание рассмотреть существование конституционных типов белко-восинтетической функции организма.

С целью поиска белковых маркеров прогнозирования течения беременности, совместно с Н.Н.Володиным, мы провели ретроспективный анализ сывороточных белков по завершению беременности в трех группах: «а» — 35 женщин с физиологическим течением беременности, «б» — 20 женщин с осложненным течением беременности на ранних сроках (токсикоз), «в» — 28 беременных, перенесшие гестоз (нефро-патию, поздний токсикоз).

^А в I триместре беременности оказался достоверно ниже среди женщин группы «в»: его уровни отличались монотонностью концентрации на протяжении всей беременности: 1,68+0,15 г/л (I), 1,61+0,11 г/л (II), рь_а СА15.3, СЕА — СА19.9, СЕА -> СА125.

В этом ряду степень приоритетности усиливается справа налево: при одномоментном увеличении сразу нескольких онкомаркёров, если среди них оказался АФП. скорее всего, имеет место первичный рак печени, а ПСА — рак простаты (одномоментного увеличения и АФП и ПСА мы ни разу не наблюдали). Размещение на одном уровне «пирамиды» СА15.3 и СЕА связано с большей эффективностью сочетанного их применения в мониторировании рака легкого, чем маркёра Syfra 21-1, представляемого как наиболее специфичного для опухолей этой

рассматривая возможные причины одномоментного повышения СА19.9 и CEA. мы пришли к выводу, что лишь уровни СА19.9 выше 12400 ед/мл могут служить бесспорным свидетельством развивающегося рака поджелудочной железы. Меньшие его значения, но превосходящие абсолютные концентрации CEA, нередко встречаются при раке восходящей и поперечно-ободочной кишок. Мы имели возможность наблюдать уникальный подъём уровня СА19.9 (до 2323 ед/ мл), не связанный с опухолью. Что касается СА125, то в предлагаемой нами схеме этот маркёр занимает последнее место, повышаясь не только при злокачественных новообразованиях различных локализаций, начиная от меланомы и до миеломы, но и при доброкачественной патологии, и прежде всего — гепатитах (до 1597 ед/мл). Между тем, любое повышение СА125 в крови должно быть объяснено, а при сочетанном его повышении о локализации опухоли будет указывать любой другой онкомаркёр.

Создание программы «Иммунологический профиль».

В содружестве с отделом ЦКБ ГНИВЦ (В.В.Тарасов, А.В.Власов, сотрудники лаборатории — к.м.н. А.П.Редькин, Г.Ю.Отставнов) разработана и внедрена автоматизированная информационная система: «Иммунологический профиль», позволяющая осуществлять заказы на исследования из 110 медицинских подразделений, оперативно их регистрировать, обеспечивать сбор информации с 6 производственных участков лаборатории, сортировку по индивидуальным картам пациентов. осуществлять подбор исследований в динамике, выделять патологические значения исследуемых параметров. Специальное дополнение к программе составляет анализ контрольных образцов, поставляемых как фирмами-производителями реагентов, так и фирмой Bio-Rad (США), ежемесячно предоставляющей информацию о качественных характеристиках работы лаборатории, по сравнению с данными лабораторий Европы и Америки.

Программа «Иммунологический профиль» позволяет взаимодействовать с внешней автоматизированной больничной информационной системой (АБИС), с помощью которой в случае необходимости можно корректировать заказ, передать полученные результаты в АБИС, получить доступ к истории болезни пациента, а также ко всем исследованиям, выполненным в других лабораториях и подразделениях больницы.

Эксплуатация системы «Иммунологический профиль» позволила облегчить труд врача-иммунолога, повысить производительность труда на 27%. Внедрённая система позволяет контролировать своевременность выполнения длительных исследований или «консервировать» заказы на временно невыполняемые анализы. Кроме того, программа сохраняет сведения о банкируемых на длительное хранение биообразцах. Так, согласно принятым правилам, все сыворотки крови, поступающие на исследование по онкопрограмме хранятся в лаборатории не менее 1,5 лет для возможности ретестирования в случае решения вопроса о возможном рецидиве заболевания.

Система предназначена для работы на 1ВМ-совместимых компьютерах, функционирующих в автономном режиме, либо в системе локальной сети, она разработана с учётом многолетней практики использования автоматизированных медицинских информационных систем, проста в эксплуатации, сокращает документооборот.

1. Иммунохимический анализ белков сыворотки крови является обязательной составляющей диагностики патологии человека и должен проводиться с учетом возрастных нормативов, представленных в настоящем исследовании. РИД, нефелометрия и РИА (включая альтернативные ЛИА и ИФА) являются базовыми, дополняющими друг друга методами при исследовании сывороточных белков. Так, при исследовании с-да удобнее применить РИД с поликлональной АС, а дефицит

подтвердить в ИФА.

2. Разработанная компьютерная программа «Иммунологический профиль» позволяет активно выявлять и прослеживать дефекты белко-во-синтетической функции организма. Согласно заданным параметрам, вычленяющим значения сывороточных концентраций в 2 раза ниже нижней и в 1,5 раза выше верхней границы нормы, эти дефекты встречались от 0.4% (1яМ) до 7,2% (Ш. а гиперпродукция — от 0.1% (СЗс) до 24% (ГГ) у всех обследованных.

3. Установлена корреляционная связь не ниже заметной между возрастной динамикой 16 из 17 сывороточных белков, с максимальной степенью тесноты в парах: ]^А/а2М (-0.85) и ]^М/&2ГП, СЗАК/ЦП (0,87).

4. При анализе динамики сывороточных белков у беременных ус-

тановлено. что в норме наиболее высоким уровням да соответствовали и более высокие уровни аШ, ИаИТ, ТФ, ЦП, ГГ. ГП, а наиболее низким уровням да соответствовали и более низкие значения а1КГ. а1АТ. ИаИТ. а2М, ПА. ГГ. ГП. Это дает основание предположить наличие конституционного типа белковосинтетической функции организма.

5. С помощью разработанного РИА определения СЛЦ-Х ^ установлено, что его физиологическая концентрация в крови взрослых составляет 0. 5-50 мкг/мл, у новорожденных — 75-150 мкг/мл. Повышение концентраций СЛЦ-Х наблюдается при АГГ (но не при ^А-дефи-ците), аутоиммунной патологии и, в особенности, при моноклональ-ной гаммапатии. При доброкачественной гипер-^-глобулинемии, сопровождающей воспалительные заболевания легких и печени, СЛЦ-Х остаются на уровне физиологических. Между уровнями СЛЦ-Х и £2М отсутствовала заметная корреляционная связь .

6. Установлено, что агглютинаторы (гомореактанты) принадлежат к даг. Среди обследованных пациентов недостаточность да2 встречалась в 2 раза чаще, чем недостаточность остальных трех с-да.

7. Выявлена прогностическая ценность исследования сывороточных белков:

а) а1КГ дополняет 1йМ в качестве маркера внутриутробной инфекции.

б) Отсутствие в I триместре беременности подъема уровней СС1КГ, С4, снижение при этом уровней а1АХТ, ГГ, ГП и а2М может оказаться предвестниками формирующегося гестоза.

в) Развивающаяся неЧ52 миелома сопровождается угнетением, прежде всего, даг.

г) Увеличение концентрации С4а и С5а является предшественником кардиогенного шока при инфаркте миокарда.

8. Оценка качественного состава белковых препаратов крови свидетельствует:

а) Концентрация да в препаратах «¡(-глобулина нестабильна даже в пределах разных серий одного препарата, половина из них процентно обеднена да2 и все — да4.

б) Препараты К_глобулина из южных и восточных регионов бывшего СССР содержат крайне низкие титры антител к ВГВ, вероятно, из-за нейтрализации АТ ИК с HBsAg. присутствующим в исходном пуле сывороток.

в) В препаратах альбумина и протеина, полученных из плацентарной крови обнаружен АФП в концентрациях 14440-74500 ед/мл. что необходимо учитывать при интерпретации результатов у пациентов, получающих такую терапию.

9. Разработана «Русская аллергологическая панель», позволяющая максимально экономично выявлять до 92% встречающихся в регионе аллергенспецифических IgE (по данным RAST).

10. Одновременное повышение нескольких онкомаркёров неимму-ноглобулиновой природы свидетельствует не о первично-множественном раке, а об опухоли, ассоциируемой с «доминирующим» онкомаркё-ром ИЗ цепи АФП, PSA СА15.3, СЕА — СА19.9, СЕА — СА125.

1. При выборе метода определения Igg необходимо учитывать возрастной контингент обследуемых. У новорожденных их лучше идентифицировать в РИД. При значительном объёме производства (более 25-30 сывороток ежедневно), среди пациентов допенсионного возраста. наиболее удобна нефелометрия. Если контингент обследуемых включает и лиц в возрасте старше 60 лет, нефелометрические исследования должны быть дополнены РИД для качественной оценки характера преципитационных колец. Во всех случаях полезную дополнительную информацию дает оценка сывороточных концентраций и соотношения Igae и IgX.

2. При выявлении двойных преципитационных колец в РИД с ан-ти-IgG сывороткой отечественного производства необходимо дополнительно исследовать анализируемую сыворотку крови в иммуноблоте: парапротеины из СЛЦ в электрофорезе могут не проявляться. Двойное преципитационное кольцо в РИД может создать не только GX-, но и Мае- и Аэе-парапротеины.

3. При назначении пациенту препаратов Y-глобулина необходимо учитывать количество и соотношение IgGl-4 в нём, отдавая предпочтение содержащим максимальные уровни IgG2 и, желательно, IgG4. Таким препаратом, в частности, является Интраглобин Ф.

4. При введении пациенту альбумина или протеина плацентарного происхождения целесообразно оценить динамику АФП в сыворотке для коррекции графика введения препаратов.

5. В программу мониторирования течения беременности помимо

Igg целесообразно включить определение alKT, С4, alAXT, ГГ, ГП, а2М, позволяющих повысить надежность прогнозирования гестоза.

6. Программу оценки состояния новорожденного, помимо определения Igg и АФП. целесообразно дополнить тестом на 01НГ, с целью повышения надежности диагностики перинатального инфицирования.

7. В диагностике аллергии целесообразно использовать «Русскую аллергологическую панель» как наиболее информативную и экономически оправданную.

8. При обнаружении в крови AT к поверхностным и ядерным АГ ВИЧ, необходим динамический анализ крови, включая БОФ, для оценки стабильности антителоносительства и прогнозирования клинической картины инфицирования ВИЧ.

9. При поиске первичного очага опухоли в случае одномоментного повышения нескольких онкомаркёров в сыворотке крови, прежде всего следует обратить внимание на уровень АФП, маркера гепатомы, и PSA, маркёра рака простаты; в других ситуациях локализацию опухоли определяют по «доминирующему» онкомаркеру.

10. Иммунологическое мониторирование пациентов, требующих длительного наблюдения на этапах стационар-реабилитационный центр-поликлиника, целесообразно проводить в условиях централизованной иммунологической лаборатории, располагающей программой «Иммунологический профиль» и включающей в себя международную программу контроля качества (например, Bio-Rad, США).

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.

1. Резников Ю.П., Куликова Н. Н., Кульберг А.Я. Агглютинаторы и их роль в инфекционной патологии матери, плода и новорожденного. //Ак. и гинекол.-1975.-N2.-С.30-32.

2. Кульберг А.Я.. Бартова Л. М.. Резников Ю. П., Юсупова-Редаи С. Исследование физико-химических и эффекторных свойств иммуноглобулина, обладающего свойствами гомореактанта (агглютинатора). //Бюлл. эксп. биологии и медицины.-1975.-М7.-С.72-75.

3. Kulberg A. J., Bartova L.M., Tarkhanova I.A., Reznikow Ju. P. and Jusupova-Redai S. Comparative Immunological Studies of IgG and Naturally Occurlng Anti-Globulin Factors to Pepsin and Papain Fragments of Homologous IgG.//Clin. Immunol. Immunopath.-1976. -N6.-P. 13-21.

4. Таболин В.А., Ярцев М.Н., Резников Ю.П. Изучение al-кислого гликопротеина при инфекционно-воспалительных заболеваниях недоношенных новрожденных. //Педиатрия. -1979. -N5.-С.47-49.

5. Сильвестров В.П., Резников Ю.П.. Королёва Н. В. Диагностическое значение определения комплемента, белкового спектра сыворотки крови и иммуноглобулинов при острых пневмониях.//Тер. apx.-1979.-N4.-C.7-ll.

6. Дорошенко Н.В., Резников Ю.П., Стаханова В.М. Радиоиммунологический метод выявления антител класса IgM к вирусу гепатита А с помощью дитиотреитола.//Сб.: «Вирусные гепатиты».-М.-1980. -С.13-17.

7. Резников Ю.П., Ванюков Н.В., Шпаков Ю.Н.. Румянцев А.Г., Басистова A.A. Возрастные показатели гуморального иммунитета и факторов неспецифической резистентности у практически здоровых людей. //Всесоюз. конф. «Актуальные вопросы иммунологии», Алма-Ата -М.-1981. -Т. 2. -С. 54-55.

8. Сильвестров В.П., Константинова И.В., Королева Н.В., Резников Ю. П., Гусева O.A., Антропова E.H.. Теплинская Г. П., Рыкова М.П., Секамова С.М. Клинический эффект и динамика показателей иммунологической реактивности у больных затяжной пневмонией при лечении левамизолом.//Тер. арх. -N10. -С.24-29.

9. Шпаков D.H., Макаровский В.В., Резников Ю.П., Халангот А.Ф. Влияние длительных автономных условий на многопрофильные биохимические и гормональные показатели крови практически здоровых мужчин.//VII Всесоюз. конф. по космич. биол. и авиакосмич. медицине. Калуга. -1982. -Ч. I. -С. 44-45.

10. Лутошкин С.Ф., Сильвестров В. П.. Бартова Л.М., Кульберг А.Я., Резников Ю.П., Луганская Е.Л. Определение титра пепсинового агглютинатора (гомореактанта) для оценки течения острой пневмонии. //Тер. арх. -1982. -N9. -С. 50-52.

11. Лутошкин С.Ф., Сильвестров В.П., Резников Ю.п., Пакулин И.А., Суровов Ю.А. Обструктивные нарушения вентиляции у больных острой пневмонией и система комплемента.//Там же.-N10.-С.69-72.

12. Хаткевич С.П., Резников Ю.П., Богомолов Б.П. Оценка динамики иммуноглобулинов и эмбриональных белков при острых вирусных гепатитах А и В.//Сб.: «Специализированная медицинская помощь в крупной многопрофильной больнице и пути её совершенствования. -М. -1982.-С.124-125.

13. Вязов С. О., Дорошенко Н.В., Хаткевич С. П., Резников Ю. П., Минакова Л. В., Шалунова Н. В., Детручук Е. М., Заиров Г. К., Ходжаев Ш.Ч., Стаханова В.М., Ананьев В.А., Львов Д.К. Антитела к антигенам вирусов гепатита А и В в коммерческих препаратах Y-глобулина. //Вопр. вирусологии. -1983. -N5. -С.542-545.

14. Резников Ю.П.. Пименова U.C., Луганская Е.Л. К вопросу об эффективности поиска IgE-антител при «нормальном» уровне общего IgE в сыворотке крови больных атопией.//VII Северо-Кавказская конференция по иммунологии, аллергологии и молекулярной биологии. -Краснодар. -1983. -С. 198.

15. Ульянов В. И.. Варюхин A.C., Резников Ю.П., Воронцова Л. П. определение динамических показателей карциноэмбрионального антигена в качестве теста эффективнсоти радикального лечения рака прямой и ободочной кишок.//Сб.: «Выявление ранних форм злокачественных опухолей». -М. -1983. -С. 60-63.

16. Резников Ю.П., Ульянов В.И., Варюхин A.C., Ванин А.И.. Воронцова Л.П.. Ермилов Е.А.. Хаткевич С.П.. Лягушина Г.В. Совре-меный диапазон применения раковоассоциированных белков в клинике. //Сб.: «Актуальные вопросы клинической иммунологии».-М. -1985. -С.44-57.

17. Макаровский В.В., Борисенко A.n., Зырянов А.М., Резников Ю. П., Ломакина Л. К. Динамика иммуноглобулинов и белков системы комплемента в крови больных инфарктом миокарда и нестабильной стенокардией.//Там же.-С. 100-104.

18. Резников D. П., Семавин И.Е.. Богомолов Б.П. Влияние препаратов плацентарного альбумина на уровень сывороточного а-фетоп-ротеина.//Тер. арх.-1986.-N2.-С. 102-104.

19. Голованова 0.Е., Резников Ю.П., Максимов Н.А., Панкратьев Л.М., Балкаров И.М.. Давыдов В.М., Пименова Н. С., Савицкий С.Н. В2-микроглобулин в сыворотке крови и моче у больных с интерстици-альным поражением почек.//Там же.-Н8.-С.27-29.

20. Шищенко В. М., Володин H.H., Гераськина В. П.. Резников Ю.П. Антенатальная диагностика и прогноз развития плода и новорожденного. //Сб.: «Формирование здоровья и профилактика его нарушений у детей».-М.-1986.-с. 154-158.

21. Резников Ю.П. К вопросу подбора оптимального спектра методов для ранней идентификации моноклоновой гаммапатии при диспансеризации. //Всесоюзная конференция: «Методология, организация

и итоги массовых иммунологических обследований». -М.-Ангарск. —

22. Резников Ю.П. Сопоставление частоты выявления дефицитов комплементарных белков с дефицитами иммуноглобулинов. //Конф.: «Актуальные проблемы иммунологии. Иммунодефицита и иммунокоррек-ция».-Владивосток. -1987.-С. 25-26.

22. Резников Ю.П. Иммунохимический контроль в клинике.// Сб.: «Научно-технический прогресс в практической медицине».-М.- 1987. -С. 74-75.

23. Боглаева Н.Л., Резников Ю. П., Коржукова П.И. Значение альфа-фетопротеина в диагностике гепатомы на фоне цирроза.//Там же. -С. 132-135.

24. Резников Ю. П., Ульянов В. И., Варюхин А. С., Ванин А. И., Воронцова Л.П., Ермилов Е.А., Лягушина Г. В., Терская Л.В., Хатке-вич С.П., Будкевич Е.А., Володин Н.Н., Афанасьева И.М., Логачёва А.И. Место карбогидратных антигенов в спектре белковых онкомарке-ров у больных с опухолями различных локализаций. //Вопр. онкол. —

25. ИроваТ.И., Резников Ю. П., Покровский В. В.. Вострикова Э.П., Трибунов Ю.П., Суворова 3. К. Возможности клинико-лаборатор-ной диагностики лимфоаденопатической стадии инфекции ВИЧ.//Тер. арх. -1988. -N7. -С. 14-16.

26. Резников Ю. П., Тополева Т.С.. ИроваТ.И., Лиознер А. Л. Возможности исчезновения анти-Н1У антител у лиц без клинических признаков СПИД. //ЖМЭИ. -1988. -N12. -С. 62-67.

27. Горячкина Л.А., Жданова Е. А., Шарапова С. В.. Резников ¡0. П. Эффективность диагностики и специфической иммунотерапии аллергических заболеваний.//Сб.: «Актуальные вопросы клинической медицины». -М. -1988. -С.206-212.

28. Сергеев Ю. В., Зимин Ю.И., Резников Ю. П.. Малышев В.С.. Пименова Н. С. Атопический дерматит. I Особенности клинического течения и состояния иммунного статуса в зависимости от исходного уровня ^Е. //Вопр. дермат. и венер.-1989.-N3.-С. 8-12.

29. Сергеев Ю.В., Резников Ю. П., Лобанова Е.В., Пименова Н.С. Атопический дерматит. II Сосотояние комплементарных белков и патогенетическая роль анафилатоксинов С4а, СЗа и С5а. //Там же.- N4. -С.4-7.

30. Крысин Ю.С., Сильвестров В.П., Лутаенко Л.В., Редькин

А.П.. Резников Ю.П. Редкая форма иммунодефицита и попытка его коррекции в условиях поликлиники.//Тер. арх. -1989.-N9.-С.151-153.

31. Резников Ю.П. Иммунохимический профиль инфекции ВИЧ и возможность клинического прогноза антителоносительства. //I Всесоюзный иммунологический съезд.-М.-Сочи.-1989.-С. 170.

32. Резников Ю.П., Лутоенко Л. В. Содержание субклассов IgG в препаратах гамма-глобулина.//Сб.: «Препараты крови для лечения и профилактики заболеваний человека».-М.-1989. -С. 75-78.

33. Каликанов С.А., Чабаненко А.И., Резников Ю.П., Аракелов С.А., Стаханова В. М. Возможный вариант ложной диагностики инфицирования ВИЧ.//Тер. арх.-1990.-N1.-С. 97-99.

34. Сергеев Ю.В., Резников Ю.П. Атопический дерматит. IV Роль ингибиторов протеиназ в патогенезе, оценке тяжести и прогнозе заболевания. //Вест. дерм, и венер.-1990.-N2.-С. 11-15.

35. Резников Ю.П. Иммунохимический анализ в клинике и пути совершенствования коммерческих белковых препаратов.//Сб.: «Стандартизация медицинских биологических препаратов для профилактики и диагностики инфекционных болезней человека».-Горький. -1990. -С. 16-18.

36. Пивень Н.В., Вигдорович И.П., Резников Ю.П. Свободные легкие цепи иммуноглобулинов. Проблемы клинической интерпретации их появления в организме.//Иммунол.-1990.-N4.-С. 16-19.

37. Resnikov Y.. Zhdanova Е. Complement system as a prognostic factor of complications from specific immunotherapy.//Annual Meeting of the European Academy of Allergology and Clinical Immunology. -Zurich. -1991. -Suppl. 40/11.-P. 98.

40. Горячкина Л. A., Жданова E. A., Резников Ю.П. Иммунохимический контроль специфической иммунотерапии атопических заболеваний.//! Республиканский съезд иммунологов и аллергологов.-Душанбе. -1991. -С. 178-180.

41. Резников Ю.П. Клиническое значение определения субклассов IgG.//Тер. арх. -1991.-N11.-С.144-148.

42. Plven N. V. and Reznlkov Y.P. Radioimmunoassay of free light chains as sensitive marker of lymphoid proliferation.// XXII Meeting of International Society for Oncodevelopmental Biology and Medicine.-Groningen.-1994.-P. 154. Same.//Tumor Biology. -1995. -V. 6. -N2-3. -p. 147.

43. Резников Ю. П., Пименова H.C., Сергеева Л.П. К выбору ме-

тода определения сывороточных иммуноглобулинов: может ли нефелометрия полностью заменить радиальную иммунодиффузию?//У Российский съезд специалистов по лабораторной диагностике.-М.-1995.-4.2.-С. 237-239.

44. Резников Ю.П.. Сура В.В., Горячкина Л. А. Лабораторное обеспечение иммунологической и аллергологической служб многопрофильного медицинского центра. //Там же. -С. 239-240.

45. Потехин О.Е., Резников Ю. П., Чуканов С.В. Комплексная оценка иммунного статуса у лиц с антителами к Т-лимфотропным вирусам человека 1 и 2 типов. //Там же.-С. 229-230.

46. Тарасов В.В., Власов А.В.. Макаровский В.В.. Никушкин Е.В., Лутошкин С. Ф., Резников Ю.П., Бобков А. И., Баринов В. Г.. Минаев В.И. Разработка автоматизированных лабораторных систем и их интеграция в больничную информационную систему. //Там же. -С.280-281.

47. Redkln A.. Malyshev V.. Reznlkov Yu., Stakhanova V. Diagnostics of hepatitis С Infection: A comparison of eight EIA assays. //XI European Congress of Clinical Chemistry.-Tampere.- 1995. -P.392.

48. Резников D. П.. Пивень H.B. Оценка свободных легких цепей иммуноглобулинов радиоиммуномикроаналитическим методом как маркёров патологии иммунной системы.//Intern. J. Immunorehabilit.-1995 -Nl.-P.60.

49. Потехин О.Е., Резников Ю.П. Иммунохимические показатели у пациентов с антителами к HTLV-I/II.//Там же.-С.73.

50. Piven N.. Goncharlc A.. Reznlkov Y. Doubl-centre Immuno-radiometric method for the determination of the immunoglobulin free light chain based on monoclonal antibodies.//Suppl.Biochiml-ca Clinica. -1995.-V. 19. -N10. -P. 75.

51. Topoleva T.S.. Reznlkov Y. P., Goryachkina L.A. Composition of «Russian panel» for in vitro diagnostic atopia.//Item.-P.108.

52. Миронова О.Г., Резников Ю.П., Богомолов Б.П. Клиническое значение al кислого гликопротеина и антипротеазных белков крови при сальмонеллёзной пищевой токсикоинфекции.//Клин. мед.-1995. -N4.-С. 78-80.

53. Резников Ю. П.. Камаева О.И.. Пименова Н. С. Политональные свободные лёгкие цепи иммуноглобулинов: клиническая интерпрета-

ция. //Тер. арх. -1996. -N1. -С. 52-54.

54. Камаева О.И., Резников Ю. П. Клиническое значение свободных легких цепей иммуноглобулинов. //Там sce.-N2.-С.78-81.

55. Reznlkov У. Measurement of immunoglobulins: nefelometry cannot completely substitute for radial immunodiffusion.//XVI International Congress of Clinical Chemistry.-London.-1996.- P. 100.

56. Резников JO. П., Мазанов Г. П., Седова Т. Н. Оценка соотношения свободного и общего сывороточного простатического специфического антигена как дополнительного метода в диагностике рака простаты. //Урология.-1996.-N6.-С.41-43.

57. ПивеньН. В., Гончарик-А. В., Резников D. П. Двухцентровый иммунорадиометрический метод определения свободных легких цепей иммуноглобулинов на основе моноклональных антител в биологических жидкостях.//Иммунология. -1997. -HI. -С. 59-62.

Источник: medical-diss.com

Иммунохимические анализы очень точные.

Иммунохимические исследования на сегодняшний день признаны одним из самых точных и результативных методов лабораторной диагностики, поскольку он обладает высокой точностью.

При помощи иммунохимического исследования можно:

диагностировать диабет,
диагностировать анемию,
диагностировать инфекционные заболевания,
оценивать функцию репродуктивной системы,
определять онкомаркеры,
проводить лекарственный мониторинг,
определять цитокины.

Иммунологическое исследование крови.

подозрение на наследственные отклонения, связанные с нарушением иммунных функций организма;
злокачественные опухоли;
патологии аллергической и аутоиммунной природы;
частые инфекционные заболевания (включая хронические);
комплексное обследование перед операцией по пересадке органов и после нее;
оценка эффективности назначенного лечения при всех вышеперечисленных состояниях.

Эти исследования крови позволяют комплексно оценить состояние защитных функций человеческого организма, поскольку оно наглядно показывает количество и все свойства иммунных клеток. Иммунохимический анализ также позволяет анализировать присутствие в крови тех или иных антител. Одним словом, иммунограмма — это целостная картина состояния иммунитета человека.

ИФА-исследование крови необходимо для выявления присутствия или отсутствие антител. Это высокоинформативный метод ранней диагностики различных инфекций.

Иммунохимические методы исследования мочи.

Иммуноэлектрофоретический анализ уропротеинов помогает изучить качественный состав белков мочи, что важно для дифференциальной диагностики гломерулонефрита и пиелонефрита.

Анализ на гормоны репродуктивной сферы.

Анализы на гормоны репродуктивной сферы очень важны для диагностики и лечении многих заболеваний.

Что может входить в этот анализ? Перечислим основные составляющие:

Фолликулостимулирующий гормон (ФСГ)
Лютенизирующий гормон (ЛГ)
Пролактин
Эстрадиол свободный (Е3)
Эстрадиол общий (Е2)
Прогестерон
Тестостерон
17-гидроксипрогестерон (17-ОН-Р)
Тестостерон свободный
Дегидроэпиандростерон-сульфат (ДГЭА-С)
Дигидротестостерон (ДГТ)
Анти-мюллеров гормон (АМГ)
Андростендион
Глобулин, связывающий половые гормоны (ГСПГ)
Андростендиол глюкуронид
Ассоциированный с беременностью плазменный протеин A (PAPP-A)
Плацентарный лактоген (ПЛ)
Свободная ?-субъединица ХГЧ (свободный ?-ХГЧ)
Хорионический гонадотропин человека (ХГЧ)

Где можно пройти диагностику всего организма? Где можно сдать анализы в Москве? ответ очевиден — в клинике Neo Vita в Крылатском. У нас вы можете не только пройти медицинское обследование, но и сделать диагностику психосоматического баланса организма — 4D диагностику здоровья. В нашем отделении диагностики вы можете сдать анализы платно, пройти ультразвуковую диагностику, записаться на консультацию к неврологу.

Источник: neo-vita.ru

МИЕЛОМА, МНОЖЕСТВЕННАЯ МИЕЛОМА, МИЕЛОМНАЯ БОЛЕЗНЬ, СЕКРЕТИРУЮЩАЯ ЛИМФОМА, ПЛАЗМАЦИТОМА, БОЛЕЗНЬ РУСТИЦКОГО и т.д. – все это синонимы одного заболевания, которое обусловлено неконтролируемым ростом плазматических клеток, продуцируемым костным мозгом. Плазматические клетки, в свою очередь, являются конечной стадией дифференциации В-лимфоцитов – основного звена клеточно-гуморального иммунитета, основная функция которых – продукция иммунных белков – иммуноглобулинов IgG, IgA, IgM, IgE, IgD, участвующих в гуморальном иммунитете. Поэтому в норме костный мозг всегда содержит некоторое количество плазматических клеток. Однако, в случае их неконтролируемого роста увеличение количества плазматических клеток приводит к их сосредоточению в виде плазмацитомы в костном мозге, особенно в позвоночном столбе, тазовых костях, ребрах, плоских костях черепа, головках тазобедренных суставов, в результате чего нормальная костная ткань и костный мозг разрушаются. Очаги деструкции видны при рентгеновском исследовании, но, к сожалению, разрешающая способность рентгена позволяет выявить разрежение костной ткани, если порядка 30% ее уже разрушено. Миеломные клетки продуцируют иммуноглобулин одного вида (моноклональный), который при специфическом электрофоретическом исследовании сыворотки крови и мочи проявляется пиком, называемым М-градиентом, где М — означает моноклональный или миеломный. Отсюда происходит название болезни – миелома. Моноклональные белки (протеины), продуцируемые миеломными клетками, имеют измененную структуру, не выполняют функций иммунитета и называются «парапротеинами». Иногда они теряют какую-то свою часть и могут продуцироваться только моноклональные легкие цепи (белок Бенс-Джонса), или моноклональные тяжелые цепи.

(ДИАГНОСТИКУ МИЕЛОМНОЙ БОЛЕЗНИ СМ. ВНИЗУ СТРАНИЦЫ)

* — скидка 3% при оформлении заказа на сайте

Неконтролируемый рост плазматических клеток приводит к множеству тяжелых последствий, из которых наиболее характерные:

Разрушение костной ткани скелета;
Нарушения кроветворения в костном мозг;
Увеличение вязкости крови из-за большого количества парапротеинов;
Снижение иммунитета из-за подавления продукции нормальных иммуноглобулинов;
Развитие почечной недостаточности из-за оседания нарушений в почечных клубочках и канальцах;

Миеломная болезнь может развиваться долгое время бессимптомно, но становится понятным, почему одними из первых характерных клинических симптомов Миеломы являются:

Боли различной интенсивности в нижней части спины, ребрах или других участках скелета;
Анемия, сопровождающаяся одышкой, слабостью, потерей зрения, болями в области сердца;
В крови наблюдается повышенное СОЭ;
Повышение содержания кальция в крови и моче из-за разрушения костной ткани;
Появляется белок в моче, что приводит к серьезным нарушениям функции почек, особенно опасно появление белка Бенс-Джонса.

Понятно и то, что из-за незнания о существовании такого заболевания пациент идет к врачам другого профиля и часто теряет драгоценное время из-за отсутствия целенаправленного и компетентного обследования. Диагностика миеломной болезни зачастую проводится уже в последнюю очередь. Что еще хуже, с проблемами в костной ткани часто больные приходят к мануальным терапевтам, не зная, что миелома – это прямое противопоказание для мануальных процедур.

При наличии одного или нескольких из перечисленных выше симптомов абсолютно необходимо обследоваться в специализированной лаборатории для исключения миеломы, поскольку раннее выявление гарантирует успешное лечение. Следует помнить, что диагноз Миеломы не может быть установлен без результатов иммунохимической диагностики крови и мочи. Своевременная диагностика миеломной болезни – залог вашего выздоровления.

Если же диагностирована множественная миелома, то для пациентов с таким диагнозом нормальным поведением является систематическое рациональное обследование и определение прогностических факторов (бета2-микроглобулин в сыворотке крови и в моче, СРБ, белок Бенс-Джонса в моче, тип парапротеина), чтобы судить о развитии миеломы, ее агрессивности и контролировать эффективность выбранной схемы лечения. Такой контроль необходимо осуществлять не реже, чем 1 раз в 3 месяца во время лечения и 1 раз в 6-12 месяцев при стойкой ремиссии.

Пациенты должны также знать о том, что специализированная иммунохимическая диагностика Миеломы осуществляется только в трех медицинских учреждениях страны, одним из которых является «Иммунотест» — автор основных патентов и методик в этой области, постоянно обновляющий диагностическую базу современными методами, что создает оптимистичное будущее для больных Миеломой. Лечение миеломной болезни – это вполне реально, и шансы на выздоровление очень высоки, особенно на ранних стадиях. Успешное лечение миеломной болезни также во многом зависит от профессионализма лечащего врача, который, исходя из своих знаний и опыта, может прописать или порекомендовать действительно эффективное средство. Множественная миелома – это не приговор!

Источник: immunotest.ru