Подготовка обследуемых
Взятие венозной крови производится натощак, в утренние часы. При взятии венозной крови необходимо учитывать ряд факторов которые могут повлиять на результат гематологических исследований: физическое перенапряжение (бег, быстрая ходьба, подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение, прием пищи накануне исследования, купение, прием алкоголя и т.д. Для исключения этих факторов, следует соблюдать следующие условия подготовки пациентов:
• взятие венозной крови осуществляется после 15-минутного отдыха обследуемого;
• пациент во время взятия сидит, у тяжелых больных взятие крови может осуществляться лежа.
• курение, прием алкоголя и пищи непосредственно перед исследованием исключаются;
Основной способ взятия венозной крови для лабораторного исследования – пунктирование вены. Венозную кровь, как правило, забирают из локтевой вены. В случае необходимости ее можно получить из любой вены (запястья, тыла ладони, над большим пальцем и т.д.). У новорожденных и грудных детей кровь обычно берется из лобной, височной или яремной вены.
При взятии крови из вены необходимо избегать: мест шрамов, гематом; вен, используемых для переливания растворов; ножных вен (у больных диабетом, при нарушениях периферического кровотока, ангиопатиях).
Оборудование
Для венепункции можно использовать три варианта пункционных систем:
• одноразовые пластиковые системы (вакутейнеры), состоящие из контейнера с навинчивающейся на него одноразовой иглой и пробирки с плотно прилегающей пробкой и вакуумом внутри;
• одноразовые шприцы с подходящим диаметром иглы;
• иглы с внутренним диаметром 0,55-0,65 мм.
Условия транспортировки венозной крови
Правильно собранная венозная кровь должна быть своевременно доставлена в лабораторию. При комнатной температуре время доставки не должно превышать 60 мин после взятия крови. Если доставка крови в лабораторию осуществляется в течении дня, то она хранится при температуре +40С-+60С (в холодильнике) и далее в специальных транспортных контейнерах в ледяной бане доставляется в лабораторию.
Во время транспортировки пробирки и контейнеры с кровью должны быть соответствующим образом защищены от вредного воздействия окружающей среды и погодных условий. При транспортировке венозной крови должны строго соблюдаться правила техники безопасности, асептики и антисептики.
Пробирки должны быть промаркированы, упакованы и плотно закрыты. Упаковка должна быть удобной для транспортировки. Сроки хранения зависят от исследуемого показателя, температуры хранения и антикоагулянта, с помощью которого осуществляется взятие крови.
Методика получения сыворотки крови (без использования разделительных или вспомогательных средств для центрифугирования)
Оборудование
1. Центрифужные стеклянные пробирки общим объемом 10-12 мл.
2. Стеклянные палочки или Пастеровские пипетки с запаянными на конце капиллярами (для отделения сгустка).
3. Центрифуга лабораторная (до 3000 об/мин).
Венозная кровь, полученная без антикоагулянтов в центрифужную стеклянную пробирку, отстаивается в ней при комнатной температуре (15-200С) в течение 30 минут до полного образования сгустка. По окончании образования сгустка пробирки открывают и осторожно проводят тонкой стеклянной палочкой или запаянным капилляром Пастеровской пипетки по внутренним стенкам пробирки по окружности в верхнем слое крови для отделения столбика сгустка от стенок пробирки. Сыворотку сливают в другую центрифужную пробирку, придерживая сгусток стеклянной палочкой, и центрифугируют, либо центрифугируют в тех же, первичных, пробирках.
После ретракции сгустка пробы центрифугируют при относительной центробежной силе RCF от 1000 до 1200 xg (максимально до 1500 xg) в течение 10 минут.
В случае использования микропробирок и центрифуги для них центрифугирование проводят при 6000-15000 xg в течение 1,5 минут. После центрифугирования сыворотку сливают во вторичные (транспортные) пробирки. Сыворотка не должна быть гемолизированной.
Плазма получается из крови путем отделения клеток крови. Она представляет собой бесклеточную надосадочную жидкость, которая получается при центрифугировании крови, свертываемость которой ингибирована добавлением антикоагулянтов тотчас после взятия. В плазме содержатся факторы свертывания крови. В связи с тем, что плазма и сыворотка содержат около 93% воды, в отличие от цельной крови, которая содержит около 81% воды, концентрация компонентов в плазме на 12% выше, чем в цельной крови. Это может иметь принципиальное диагностическое значение при исследовании активности, например ЛДГ у которого наиболее высокая концентрация наблюдается в сыворотке крови, чем в плазме.
Широко применяются коммерческие системы для получения плазмы. Они представляют собой пробирки или устройства типа шприцев (“вакутейнер”) с вакуумом внутри, содержащие различные антикоагулянты и/или ингибиторы гликолиза. Как и в случае устройств для сыворотки, эти пробирки для плазмы имеют разные варианты, содержащие разделительные гели и гранулят из полистирола, ускоряющие получение плазмы, облегчающие транспортировку и хранение. В них уже имеются антикоагулянты и метки до которых следует набирать кровь.
Методика получения плазмы
Венозную кровь, полученную с антикоагулянтом немедленно после взятия перемешивают переворачиванием пробирок с кровью, закрытых крышками, не менее 5 раз. Перемешивание должно осуществляться без встряхивания и пенообразования. Время между началом наложения жгута и смешиванием крови с антикоагулянтом не должно превышать 2 минут.
После уравновешивания пробирок с кровью, их центрифугируют при RCF 1000-1200 xg, но не более 1500 xg, в течение 10-15 минут. Плазму немедленно сливают в транспортную центрифужную или химическую пробирку. Пробирку закрывают крышкой.
Условия транспортировки плазмы крови
Правильно полученная и собранная плазма крови должна быть своевременно доставлена в лабораторию. При комнатной температуре время доставки не должно превышать 24 часа. Если доставка плазмы в лабораторию осуществляется в течение дня, то она хранится при температуре +4. +80С (в холодильнике) и далее в специальных транспортных контейнерах в ледяной бане доставляется в лабораторию. Для более длительного хранения плазма может быть заморожена при температуре –200С.
Правила транспортировки плазмы такие же как и венозной крови.
По материалам www.analyz24.ru
Взятие крови следует проводить в резиновых перчатках , соблюдая правила асептики: обрабатывая перчатки 70% спиртом перед каждым взятием.
Для исследования цельной крови используют либо кровь с антикоагулянтом, либо осуществляют забор капиллярной крови.
Капиллярную кровь отбирают путем прокола мякоти пальца (лучше IV пальца) индивидуальным стерильным копьем, палец предварительно и после забора крови протирают стерильным тампоном (ватным шариком), смоченным в 70% этиловом спирте. Из-за вероятного разведения крови спиртом, оставшимся на пальце, необходимо следить, чтобы палец во время прокола был сухим. Совершенно недопустимо использование одной микропипетки для нескольких пациентов! Допускается нанесение нескольких капель крови обследуемого на чистое часовое стекло, откуда и производится забор крови в микропипетку. Извлекать скарификаторы следует только с помощью пинцета, хранящегося в растворе дезинфицирующего средства. Стерильные тампоны хранятся в упаковке из бумаги, указанной в ОСТе 42-21-2–85, в количестве не более 20 штук. Стерильные лабораторные инструменты хранятся в той же упаковке, в которой проводилась их стерилизация.
При получении сыворотки антикоагулянт не используют. Венозную кровь берут утром натощак путем пунктации локтевой вены сухой острой короткой иглой с широким просветом (без шприца) непосредственно в пробирку по стенке. Предпочтительнее применять одноразовые пластмассовые пробирки, так как может происходить обмен ионами между кровью и стеклом, не исключены следы моющих средств. Требуется учитывать положение тела (сидя или лежа) и при повторных исследованиях, по возможности, производить взятие крови так же.
При взятии крови из артериального или венозного катетера необходимо предварительно удалить остатки лекарственного раствора из системы. Это производится путем отсасывания шприцом небольшого количества крови, и только после этого отбирают кровь вторым шприцом.
Выбор материала (цельная кровь, плазма, сыворотка или клетки крови) зависит от целей исследования и определяемого показателя:
1. Может определяться разницей в содержании определяемого вещества в капиллярной и венозной крови (табл.1).
2. Возможны различия в содержании метаболитов в клетках крови и жидкой ее части:
- например, мочевина и глюкоза равномерно распределены между плазмой и эритроцитами, поэтому эти показатели можно определять как в цельной крови, так и в сыворотке (плазме).
- для большинства исследований нужно использовать сыворотку или плазму (для определения неравномерно распределенных микроэлементов и билирубина), при этом нужно учитывать, что в процессе свертывания крови и стоянии сыворотки над сгустком происходит разрушение форменных элементов. Это искажает результаты исследования как за счет увеличения жидкой части пробы, так и из-за выхода некоторых веществ.
- необходимо также учитывать, что плазма крови более богата белками, а в сыворотке крови отсутствуют белки свертывающей системы, участвующие в образовании фибринового сгустка.
- в некоторых случаях рекомендуется использовать плазму крови. К примеру, ионы калия и ряд ферментов (кислая фосфатаза, аргиназа, ферменты гликолиза, аминотрансферазы) в значительном количестве содержатся в тромбоцитах и эритроцитах и освобождаются из них в процессе свертывания.
По материалам biokhimija.ru
КРОВЬ — жидкая соединительная ткань, которая состоит из жидкой части — плазмы и находящихся в ней во взвешенном состоянии, форменных элементов — эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов.
Для получения плазмы кровь необходимо предохранить от свёртывания добавлением антикоагуляторов – веществ, препятствующих свертыванию крови (гепарин, лимонно — кислый натрий).
СТАБИЛИЗИРОВАННАЯ КРОВЬ — кровь, предохраненная от свертывания. В пробирку или стеклянный цилиндр с антикоагулятором выпустить по 10 мл крови из яремной вены животного. Закрыв сосуд пальцем или пробкой, несколько раз перевернуть его для перемешивания крови.
1 способ. Цилиндр поставить в термостат кровь лошади — на 1 час, крупного рогатого скота — на 24…48 часов.
2 способ. Пробирку с взятой кровью поставить в центрифугу. Центрифугировать при 3000 об/мин в течение 20…30 минут.
Убедиться, что при стоянии или центрифугировании кровь расслаивается на плазму и форменные элементы (рис. 3).
Рис. 3. Состав стабилизированной крови.
1 – плазма; 2 – слой лейкоцитов; 3 — слой эритроцитов.
Если выпущенную в сосуд кровь не стабилизировать антикоагулятором, происходит ее свертывание и образуется сгусток, содержащий форменные элементы и выпавший в осадок белок фибриноген.
Сгусток постепенно уплотняется, стягивается и от него отделяется прозрачная желтоватого цвета жидкость – сыворотка (происходит процесс ретракции) (рис. 4).
Рис. 4. Ретракция кровяного сгустка.
1 — сыворотка крови; 2- сгусток крови.
СЫВОРОТКА — представляет собой плазму, лишенную белка фибриногена и других веществ, участвующих в свертывании крови.
1 способ. В пробирку или цилиндр без антикоагулятора выпустить 10 мл крови животного и поставить ее в термостат при 38°С на несколько часов. Образование кровяного сгустка и частичная ретракция, т.е. его стягивание и самопроизвольное отделение сыворотки наступает у лошадей через 1…3часа, а полное отделение сгустка через 12…18 часов. У крупного рогатого скота ретракция протекает значительно медленнее. Из пробирки, с полной ретракцией сгустка, слить или отсосать сыворотку и сравнить ее с плазмой. Сыворотка имеет желтовато-соломенный цвет и более прозрачна, чем плазма.
2 способ получения сыворотки. При выделении из крови фибриногена механическим путем, получают кровь, которая содержит все составные части, кроме белка фибриногена — ДЕФИБРИНИРОВАННУЮ КРОВЬ, т. е. эта кровь, теряет способность к свертыванию. Состав дефибринированной крови (рис.5).
Рис. 5. Состав дефибринированной крови.
1 — сыворотка; 2- слой лейкоцитов; 3- слой эритроцитов.
Получение дефибринированной крови
Дефибринированную кровь разлить в центрифужные пробирки и центрифугировать при 3000 об/мин в течение 10…15 минут. Форменные элементы оседают на дно. Сверху окажется сыворотка. Иногда она приобретает красноватый оттенок, вследствие разрушений эритроцитов из дефибринированной крови.
Положить в стеклянную колбочку 10…12 стеклянных бусинок и выпустить в нее из сосуда животного 20…30 мл крови. Взбалтывать кровь вращательными движениями в течение 10…15 минут. Фибриноген, выпадающий в осадок в виде волокнистых нитей фибрина, оседает на шариках. Затем профильтровать содержимое колбы через 2 слоя марли. Фильтрат представляет собой дефибринированную кровь, а осевшие на шариках «метелки» — нити фибрина — отмыть от форменных элементов водой. Фибрин имеет вид белого волокнистого вещества.
Работа 3. Определение скорости свёртывания крови
при разных температурных условиях
СВЕРТЫВАНИЕ крови — сложный биологический процесс, протекающий при участии солей кальция, витамина К, ферментов тромбопластина, промбина и других компонентов плазмы (рис. 6).
Нанести по одной капле крови, вытекающей из надрезанного уха животного, на три предметных стекла. Одно стекло поместить в термостат при +40 о С, другое стекло положить на стол (при комнатной температуре), третье — на снег.
Через каждую минуту наклонять стекла с кровью и повторять до тех пор, пока кровь не свернется. Определить скорость свертывания крови у различных животных.
Данные записать в тетрадь, проанализировать.
1. Где, у животных, берут большое и малое количество крови для анализа.
2. Что такое плазма и как ее получить?
3. Дайте понятие сыворотке, какие есть способы ее получения.
4. Что такое дефибринированная кровь и каков ее состав?
5. В чем заключается механизм свертывания крови, и, какие факторы влияют на него?
Рис. 6. Классическая схема свертывания крови Шмидта — Моравица.
ЗАНЯТИЕ 2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЪЕМНОГО СООТНОШЕНИЯ ФОРМЕННЫХ ЭЛЕМЕНТОВ И ПЛАЗМЫ. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВЯЗКОСТИ КРОВИ. ГЕМОЛИЗ. ОСМОТИЧЕСКАЯ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ (УСТОЙЧИВОСТЬ ЭРИТРОЦИТОВ)
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: Определить соотношение форменных элементов и плазмы в крови животных, вязкость крови, проследить за явлением гемолиза эритроцитов под влиянием повреждающих факторов с разным механизмом действия, определить осмотическую устойчивость эритроцитов разных видов животных.
Работа 1. Определение объёмного соотношения форменных
элементов и плазмы (показатель гематокрита)
Форменные элементы – 35…45%., плазма составляет 60…65% общего объема крови. Это соотношение изменяется в зависимости от вида, возраста, породы животных, функционального состояния, а также при некоторых заболеваниях.
ПОКАЗАТЕЛЬ ГЕМАТОКРИТА – показывает общий объем форменных элементов в 100 объемах крови. Показатель гематокрита используется при вычислении ряда других важных характеристик крови (среднего объема эритроцитов, среднеклеточной концентрации гемоглобина и пр.).
Набрать через узкий конец капиллярной трубочки гематокрита стабилизированную кровь животного. Трубки затянуть резинками и поставить в центрифугу. Центрифугировать 8…10 мин при 3000 об/мин. Извлечь капилляры. Форменные элементы располагаются в одной стороне капилляра, а плазма в другой. По показателям капилляров взять среднее из двух, определить относительный объем форменных элементов и плазмы, выразив их в процентах.
По материалам studfiles.net
1. Все процедуры по взятию крови, ее лабораторному исследованию необходимо проводить в спец. одежде (халат, головной убор) и перчатках!
2. Для полного морфологического исследования крови достаточно иметь несколько капель ее. Важно всегда обращать внимание на то, чтобы подвергающаяся исследованию кровь была только что получена и жидкая. Нельзя сжимать участок взятия крови, так как при этом в вытекающую кровь попадает тканевая жидкость, что искажает результаты исследования. Не рекомендуется повторно брать кровь для исследования из одного и того же места.
3. Волосяной покров на месте взятия крови, коротко выстригается или выбривается. Затем кожа протирается спиртом, а потом эфиром. Эфир высушивает кожу и вызывает реактивное расширение сосудов после их первоначального сужения. Если кожа грязная, ее вначале необходимо вымыть теплой водой с мылом, а затем хорошо просушить ватой и обезжирить эфиром.
4. При уколе в кровеносный сосуд уха необходимо, с противоположной стороны, поддерживать ухо пальцем с целью создания твердой основы. Между пальцем и ухом должен быть положен небольшой ватный шарик, чтобы избежать ранения пальца.
5. Кровеносный сосуд должен пересекаться иглой поперек. При продольном проколе стенки сосуда быстро сходятся и кровь не выходит в ранку. Укол делается умеренной глубины, с таким расчетом, чтобы не проколоть противоположной, второй стенки сосуда. Если ранка небольшая, кровь выделяется самопроизвольно небольшими каплями. Большие капли или вытекание крови струйкой нежелательны, особенно при приготовлении мазков. В случаях, когда кровь вытекает слабо или перестает выделяться, ухо можно слегка подавить или похлопать на противоположной стороне. Первые капли крови для гематологического исследования не используются и их удаляют ватным тампоном.
6. У лошадей, крупного рогатого скота, свиней, коз, овец, собак, кошек, кроликов и морских свинок небольшое количество крови обычно берут из сосудов внутренней или наружной поверхности уха (краевая вена уха) при помощи пера Дженнера, или инъекционной иглы, или небольшой насечки скальпелем. У птиц из гребня кровь берется иглой Франка, хотя можно пользоваться также и оспопрививательным пером. Получить кровь можно, надрезав край уха.
У верблюдов кровь берут из надреза уха или прокола кожи на горбе.
У крыс и мышей кровь получают из хвоста, отрезая его кончик, предварительно очистив его и нагрев компрессом до 30°.
У кур кровь берут из прокола кожи или разреза на гребне, а у уток и гусей — из мякоти ступни ног.
7. Большое количество крови получают из вен.
У лошадей, крупного рогатого скота, коз, овец и верблюдов кровь берут из яремной вены v. jugularis. На месте, где предполагается произвести прокол, выстригают шерсть и дезинфицируют кожу спиртом или 5%-ным раствором йода. Кровопускательную иглу предварительно кипятят в течение 5—10 минут. Большим пальцем левой руки слева у основания шеи нажимают на вену, что задерживает отток крови, и вена набухает в виде толстого шнура. Берут в правую руку кровопускательную иглу, вводят ее под острым углом по направлению к голове в вену и продвигают в полость сосуда. В случае, если кровь не вытекает, рекомендуется повернуть иглу вокруг продольной оси и слегка продвинуть вперед или отвести назад.
У свиней большое количество крови получают из хвоста, отрезая его кончик; у собак — из v. saphena; у кроликов — из ушной вены; у морских свинок — из сердца иглами соответствующего диаметра и длины. У кур кровь получают из v. cutanea ulnaris или a. brachialis. Для этого на внутренней стороне крыла над локтевым сочленением удаляют несколько перьев и надрезают сосуд скальпелем или маленькими ножницами.
8. Для получения сыворотки крови кровь из вен собирают в сосуд цилиндрической формы, причем, чтобы она не вспенивалась, струю ее необходимо направлять по стенке сосуда.
Сосуд с кровью ставят на 15—20 минут в термостат для свертывания. Для лучшего выделения сыворотки образовавшийся сгусток крови отделяют от стенок сосуда обожженными над пламенем спиртовки проволокой или тонкой стеклянной палочкой, обводя ими по стенкам сосуда вокруг сгустка.
9. Для получения плазмы вытекающую из кровеносного сосуда кровь смешивают со стабилизаторами, или противосвертывающими веществами (см. ниже). Полученная таким способом кровь после долгого отстаивания или центрифугирования расслаивается на плазму (вверху) и форменные элементы (внизу).
10. Кровь для исследования берут в следующей последовательности: первую каплю стирают и из последующих набирают:
– в капилляр для определения гемоглобина,
– затем берут кровь в смеситель для подсчета лейкоцитов и эритроцитов.
– предметных стеклах делают мазки и толстую каплю.
После каждой манипуляции остаток крови стирают ватой.
11. Взятие крови для клинических целей и при проведении экспериментальных работ необходимо проводить по возможности в одни часы и однообразной методикой. Если у животного кровь берется из уха многократно, то необходимо уши чередовать и стараться брать вначале у кончика уха, а затем все ближе к основанию. Это необходимо для устранения влияния местной реакции на показания крови.
Принудительной фиксации лучше избегать, если же в этом встречается необходимость, то при всех исследованиях нужно фиксировать животное одним и тем же методом, так как различные методы фиксации сказываются не только на количественных показателях, но даже и на формуле крови
Противосвертывающие вещества
Исследуют цельную кровь, а также плазму и сыворотку. В первом и во втором случаях нередко бывает необходимо предотвратить свертывание крови. Для этого к крови прибавляют какое-либо вещество, предотвращающее свертывание. К таким веществам относятся:
1. Нейтральные соли — сернокислый магний и сернокислый натрий. Свертывание крови нейтральными солями предотвращают следующим образом: в сосуд для сбора крови любого животного предварительно наливают четверть объема 25%-ного раствора сернокислого магния или половину объема полунасыщенного раствора сернистого натрия. Получаемая при этом плазма может сохраняться жидкой неограниченное время.
В качестве веществ, предохраняющих кровь от свертывания, с успехом можно применять смесь солей по следующей прописи:
– оксалат аммония (щавелевокислый аммоний) — 3,0;
– оксалат калия (щавелевокислый калий) —2,0;
– вода дистиллированная — 250 мл.
Раствор наливается в пробирки, куда будут брать кровь, из расчета 1 мл на 5 мл крови и выпаривают в сушильном шкафу при температуре 100°.
2. Вещества, способствующие удалению из крови извести, — лимоннокислый натрий (цитрат натрия; концентрация раствора не должна превышать 0,3%), щавелевокислый натрий (оксалат натрия; конц. р-ра не более 0,2%), фтористый натрий (конц. р-ра не более 0,1%). Большие концентрации растворов вызывают в крови различные изменения, до гемолиза включительно.
В пробирку с отметкой 10 мл наливают 0,3—0,5 мл какого-либо из указанных консервантов, а затем пробирку наполняют кровью до метки. После этого закрывают пробирку пробкой и 15—20 раз перевертывают (аккуратно!) для лучшего смешивания крови с противосвертывающим веществом. То же делают и при применении сухих противосвертывающихся веществ.
3. Вещества животного происхождения — пептон, гирудин, гепарин. Средства животного происхождения предотвращают свертывание крови при разных способах применения. Пептон предотвращает свертывание крови только при внутривенное впрыскивании раствора его из расчета 0,3 г на 1 кг веса животного. Прибавление пептона к выпущенной крови безрезультатно.
Гирудин, гепарин и другие аналогичные вещества предотвращают свертывание крови как при введении в кровяное русло, так и при добавке к крови в виде растворов. Используют 1%-ный водный раствор гепарина. Его помещают в пробирку, в которую будут брать кровь, из расчета одна капля на 5 мл крови. Затем жидкость испаряют в сушильном шкафу при температуре 80—100°.
4. Трилон Б (динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты (комплексон-III, трилон Б, хелатон III, ЭДТА) — образует очень устойчивые комплексные соединения с большинством катионов.
Для защиты от микроорганизмов можно использовать антибиотики и тимол, который прибавляют из расчета 3 мг на 10 мл крови. Можно с этой целью использовать также хлорбензол. Для одновременной стабилизации и консервации рекомендуется следующая смесь: в ступке растирают 10 частей фтористого натрия, 1 часть тимола, 3 части оксалата калия; 50 мг этой смеси прибавляют на 15 мл крови.
В предохраненной от свертывания крови происходит ряд изменений, отражающихся на результатах исследований: разложение глюкозы с образованием молочной кислоты (гликолиз), изменение количества сахара и молочной кислоты, изменение реакции и напряжения СО2, разложение азотистых соединений, гидролиз органических фосфатов клеток, изменение оболочки эритроцитов, ведущее к нарушению распределения неорганических соединений, и т. д. Поэтому кровь, в которую добавлены противосвертывающие вещества, необходимо по возможности исследовать в более короткие сроки после взятия.
Отделение плазмы от эритроцитов необходимо производить в течение первого же часа, в противном случае процессы, протекающие в крови, искажают картину исследования. Нередко в лабораторной практике для отделения эритроцитов от общей массы крови прибегают к дефибринированию крови, что достигается непрерывным встряхиванием ее в закрытом сосуде со стеклянными бусами в течение 15—20 минут. Кровь в этом случае берут в посуду, содержащую бусы, и начинают взбалтывать в момент наполнения сосуда. После взбалтывания кровь фильтруют через двойной слой марли для освобождения ее от фибрина.
По материалам referatwork.ru