Расшифровка анализа крови гепатит с методом пцр количественный

Диагностика гепатита включает целый комплекс анализов для определения наличия вируса в крови. Одним из способов обнаружения заболевания является такой метод исследования, как ПЦР на гепатит С. Что это такое, почему анализ ПЦР на гепатит так важен, как его проводят и расшифровывают?

Полимеразная цепная реакция, или ПЦР, используется для диагностики язвы желудка, колита, энтерита. Но главное ее преимущество заключается в том, что она помогает обнаружить в организме как сам вирус гепатита C, так и антитела к нему, которые обладают способностью не вызывать реакции иммунной системы из-за их способности к мутации.

Исследование и его суть заключаются в создании определенных условий, при которых происходит цепная реакция РНК гепатита. Если при их сопоставлении с нуклеотидной последовательностью вируса гепатита C выявляются совпадения, это свидетельствует о том, что в крови имеются вирусные частицы, а в печени происходят процессы распада. Если количество вируса ниже определенного уровня, выносится отрицательный диагноз, если выше – положительный.

Существует два вида исследования крови методом ПЦР при гепатите: количественный анализ и качественный анализ.

Количественный ПЦР, как упомянуто выше, определяет концентрацию РНК вируса гепатита. Кроме того, он способен дать информацию об интенсивности, с которой развивается патология, и эффективности назначенного лечения. Количественный анализ на гепатит C крайне важен, поскольку фиксирует резистентность к действию противовирусных препаратов и позволяет скорректировать терапию.

После того как больной пройдет курс лечения, ПЦР помогает определить дальнейший порядок назначений. В некоторых случаях выявляется необходимость дополнительных обследований. Например, если уровень АЛП повышен (но не более, чем в 2 раза в течение полугода), а расшифровка анализа указывает на вирусную нагрузку выше 105 МЕ/мл, пациенту назначается биопсия. Если количественный анализ на ПЦР выявляет сильное воспаление и фиброз, больному прописывают курс лечения противовирусными препаратами.

В ситуациях, когда большое количество вирусных частиц сочетается с высоким показателем АЛТ, пациенту незамедлительно должно быть назначено лечение без проведения дополнительных диагностическим мероприятий.

Пройдите этот тест и узнайте есть ли у вас проблемы с печенью.

Качественно расшифровать показатели при количественном анализе крови на гепатит могут только квалифицированные и опытные специалисты, а современные технологии помогают сделать это при низкой концентрации вируса в крови.

Качественный анализ ПЦР направлен на определение и подтверждение фактического присутствия вируса в организме. Его проводят при обнаружении в крови антител к гепатиту. Именно качественный анализ на гепатит гарантирует точность результата на 100% и позволяет поставить диагноз на ранних стадиях заболевания, что дает возможность начать борьбу с гепатитом уже в течение первых недель после заражения и повышает шансы на полное выздоровление (в случае с заболеванием типа B).

При исследовании методом ПЦР и расшифровке анализа крови на гепатит можно также определить генотип возбудителя заболевания. Всего существует 6 генотипов вируса и большое количество субтипов, однако в нашем регионе распространение получили 1, 2 и 3 генотипы.

Другими преимуществами данного вида диагностики являются:

высокая точность полученных показателей и низкая вероятность ошибки в них;
высокий уровень чувствительности к вирусным частицам в крови;
возможность выявления сразу нескольких возбудителей;
диагностика болезнетворных внутриклеточных микроорганизмов, обладающих высокой антигенной изменчивостью;
работа с расшифровкой анализа на гепатит позволяет обнаружить скрытые текущие инфекции.

Анализ ПЦР на гепатит обязательно сдают следующие категории людей:

беременные женщины;
сотрудники учреждений здравоохранения;
потенциальные доноры крови и органов;
те, кто имеют характерные признаки заболевания;
ВИЧ-инфицированные лица;
наркозависимые;
лица, ведущие беспорядочную половую жизнь.

Забор крови для ПЦР-исследования производится из вены. Как правило, это происходит утром до того, как человек поел, поскольку после приема пищи должно пройти минимум 8 часов. В крайних случаях кровь могут взять на исследование днем или вечером, но временной зазор между анализом и приемом пищи должен составлять не менее 5 часов.

Человеческий фактор может количественно отразиться на результатах: их точность в некоторых случаях снижается со 100% до 95%, поэтому к сдаче крови необходимо заблаговременно готовиться. Качество биоматериала для анализа будет соответствующим при следовании пациентом следующим правилам:

перед сдачей крови можно пить только чистую воду;
за двое суток до проведения исследования нужно отказаться от приема жареной и жирной пищи, а также алкогольных напитков;
за сутки до посещения лаборатории следует прекратить прием лекарственных средств. В случае если это не представляется возможным, об этом в обязательном порядке необходимо предупредить лаборанта и лечащего врача;
накануне нужно избегать стрессовых ситуаций и физических нагрузок;
не следует проходить ультразвуковое, рентгенологическое и инструментальное исследования незадолго до сдачи крови;
в течение часа до анализа необходимо воздержаться от курения;
за 20 минут до сдачи крови нужно отвлечься, успокоиться и выровнять дыхание.

Если исследование проходит ребенок до 5 лет, родители должны проследить, чтобы он пил кипяченую воду каждые 10 минут в течение получаса до забора биоматериала.

Расшифровка анализа может быть представлена словами (в случае качественного исследования), например, «не обнаружено» или «ниже диапазона изменений». В первом случае, это свидетельствует о том, что инфекция не обнаружена. Во втором – что вирус присутствует, но в незначительном количестве. Такая ситуация требует проведения повторного исследования.

Вирусная нагрузка определяется по количеству инфекционного РНК и обозначается как МЕ/мл или копии/мл.

Нормальным показателем (нормой) количественного анализа на гепатит C является диапазон от 1,8х102 до 2,4х107 МЕ/мл.

Концентрация вируса в крови может быть:

низкой: от 600 МЕ/мл до 3х10 4 /мл;
средней: от 3х10 4 МЕ/мл до 8х10 5 МЕ/мл;
высокой: более 8х10 5 МЕ/мл.

Количественны и качественны анализ ПЦР на гепатит позволяет определить наличие вируса в организме и уровень его концентрации. Полиразмерная цепная реакция способна диагностировать заболевание на ранних стадиях, но для этого необходимо, чтобы больные как можно раньше обращались в медицинские учреждения за помощь и строго следовали рекомендациям лечащего врача.

По материалам zpechen.ru

Существует множество субтипов HCV, из-за чего не всегда удается подобрать эффективные противовирусные лекарства и достичь желаемых результатов в лечении. Разнообразие возбудителей обусловлено их способностью изменять свою структуру, то есть мутировать. Вследствие этого иммунитет не успевает сформировать мощный ответ против патогенного агента, а медикаменты оказываются неэффективными.

Зачастую гепатит диагностируется на стадии цирроза, чему предрасполагает позднее выявление болезни из-за отсутствия клинических признаков. Только путем лабораторного исследования удается обнаружить HCV в инкубационном периоде.

Количественный анализ на гепатит С дает возможность не только установить факт присутствия возбудителя в крови, но и подсчитать его концентрацию.

Специфической подготовки к лабораторной диагностике не требуется. Достаточно придерживаться следующих рекомендаций:

количественный анализ проводится натощак, при этом последний прием пищи – за 8 часов до забора крови;
за двое суток следует отказаться от спиртного и «тяжелых» блюд;
особое значение имеют лекарственные средства, которые принимает пациент. Они могут повлиять на результат исследования, поэтому врач должен знать о них.

Также не желательна тяжелая физическая нагрузка и физиотерапевтические процедуры накануне забора крови. Чтобы расшифровка количественного анализа на гепатит С получилась достоверной, не стоит пренебрегать вышеперечисленными рекомендациями.

Зачастую результат анализа пациент получает через сутки. Цена исследования на определение концентрации возбудителя в крови зависит от лаборатории и качества реактивов и может достигать 4 тысяч рублей.

К числу первостепенных методов диагностики относится ИФА, или иначе иммуноферментный анализ. Он назначается для обнаружения специфических антител к HCV. Его эффективность достигает 95%. Если расшифровка исследования дает положительный результат, стоит заподозрить присутствие возбудителя в крови.

Заметим, что у половины обследуемых при «+» тесте в ходе дальнейшей диагностики вирусный агент в крови не выявляется. ИФА в данном случае указывает на перенесенный контакт с HCV в прошлом, что подтверждается циркулирующими антителами.

Более точным исследованием является полимеразная цепная реакция, или иначе ПЦР. Она позволяет определить концентрацию РНК возбудителя в крови. Обнаружив генетический набор вируса в биологическом материале, врач подтверждает гепатит С.

ПЦР назначается пациенту для верификации диагноза. Она дает возможность выявить РНК на стадии, когда антитела еще отсутствуют. Существует несколько видов генетических исследований:

количественный анализ ПЦР на гепатит С, который не только устанавливает факт присутствия возбудителя в крови, но и предоставляет информацию о его концентрации;
качественный – подтверждает инфицирование;
генотипирование – позволяет определить генотип патогенного агента и подобрать наиболее эффективные лекарства против него.

Как уже было сказано, существует несколько видов лабораторного исследования:

качественный анализ – свидетельствует о присутствии патогенного агента в крови. Данный вид диагностики имеет определенный «уровень реагирования», поэтому не всегда оказывается достоверным. Чтобы правильно расшифровать результаты и получить реальные показатели, для исследования рекомендуется использовать тест-систему с чувствительностью — не ниже 50 МЕ/мл. Норма анализа – это «отрицательный ответ» или «вирус не обнаружен». Это указывает на отсутствие генетического набора возбудителя в исследуемом материале. Если результат оказался положительный, требуется дальнейшее обследование пациента;
количественный анализ ПЦР на гепатит С определяет вирусную нагрузку, то есть концентрацию патогенного агента в крови. Результат исследования показывает число единиц РНК в фиксированном объеме биологической жидкости;

Вирусная нагрузка – это подсчет инфекционной РНК в одном миллилитре крови исследуемого. Единицы измерения – МЕ/мл, однако некоторые лаборатории определяют «копии/мл», при этом указывая на бланке нормы анализа для сравнения и оценки результатов.

генотипирование. Из-за способности возбудителя изменяться выбор эффективных противовирусных лекарств для терапии должен осуществляться на основании его генотипа. От него зависит не только результат, но и длительность лечебного курса. Так, гепатит HCV 1 требует назначения медикаментов на год, однако положительная динамика наблюдается лишь в 60% случаев. Что касается второго и третьего генотипов, то они являются менее стойкими к действию противовирусных средств, из-за чего эффективность терапии превышает 85%. При получении такого результата исследования – «вирус не типируется», стоит заподозрить присутствие возбудителя, который не распознается стандартными тест-системами.

Расшифровка количественного анализа на гепатит С необходима для:

дальнейшего обследования пациента, когда при ИФА были обнаружены антитела к HCV;
подтверждения диагноза;
установления вирусной нагрузки при микст-инфекции, когда человек заражен несколькими видами возбудителя;
определения тактики лечения (выбора противовирусных медикаментов, их замены или завершения терапии);
оценки динамики прогрессирования заболевания, а также эффективности лекарств;
определения стадии патологии (острая, хроническая).

ПЦР имеет следующие преимущества:

хорошая чувствительность, благодаря чему удается подсчитать даже небольшое количество вируса;
определение самого возбудителя (РНК), а не антигенов;
специфичность методики — установление определенного типа патогенного агента;
быстрота получения результатов, ведь для анализа не требуется выращивание культур на питательной среде. Ответ готов через 5 часов;
универсальность – позволяет выявить генетический набор различных возбудителей, как РНК, так и ДНК-содержащих (гепатит В);
обнаружение скрытой инфекции.

Лабораторное исследование помогает подтвердить диагноз и является неотъемлемой частью комплексного обследования (анализа клинических симптомов, результатов ИФА и биохимии).

Кроме того, ПЦР широко используется в аллергологии, генетике, а также для установления факта отцовства.

Оценка результатов лабораторной диагностики осуществляется врачом путем сравнения полученных данных с нормой.

По материалам propechenku.ru

Вирусный гепатит С — тяжелое заболевание, которое протекает с поражением печени. У восьмидесяти процентов больных оно переходит в хроническую форму. Вирус размножается в клетках печени — гепатоцитах — и вызывает их гибель. Отмершая ткань замещается очагами соединительной ткани, развивается фиброз.

По мере развития фиброза печень оказывается неспособна выполнять свои функции, начинается цирроз печени, который опасен своими осложнениями: повышением давления в системе портальной вены, желудочно-кишечными кровотечениями, нарушением свертывания крови, изменениями психики из-за повреждения ядер головного мозга токсическими продуктами.

Причина заболевания — заражение вирусом из семейства Flaviviridae, который относится к типу РНК-вирусов. Это значит, что генетический материал, по которому синтезируются белки возбудителя, закодирован в молекуле рибонуклеиновой кислоты. Заражение происходит через кровь, половым путем, и от беременной женщины к плоду. К сожалению, между инфицированием и началом выработки антител может пройти достаточно большое количество времени — от двух недель до шести месяцев. Это не дает определить заражение методом иммуноферментного анализа и начать лечение на ранних стадиях.

ПЦР — метод молекулярного анализа, который позволяет обнаружить генетический материал возбудителя уже на первой неделе после инфицирования с помощью полимеразной цепной реакции. Исследование обладает высокой специфичностью, точностью, и позволяет не только определить наличие или отсутствие вируса, но и его концентрацию и генотип.

Для исследования берут кровь пациента, в которой потенциально может находиться РНК вируса. В кровь добавляют праймеры — искусственно синтезированные участки искомого гена малой длины, и РНК-полимеразу — специальный фермент, который многократно увеличивает количество генетического материала возбудителя. С помощью специального аппарата проводят несколько циклов нагревания и охлаждения. Затем материал анализируют и сопоставляют с известными генами вируса, на основе чего делают заключение о наличии или отсутствии заражения.

Различают три вида ПЦР-анализа:

Качественный анализ ПЦР

Количественный анализ ПЦР . Позволяет определить вирусную нагрузку — концентрацию генетического материала возбудителя в одном миллилитре крови. Это исследование проводят перед началом терапии, а затем на первой, четвертой, двенадцатой и (если курс длительный) двадцать четвертой неделе лечения, чтобы оценить его эффективность.

Генотипирование . Возбудитель гепатита С часто и быстро мутирует. На планете было обнаружено семь вариантов генотипа этого вируса. В России распространены первой, второй и третий тип. Каждый из генотипов обладает различной устойчивостью к терапии, например эффективность лечения первого типа составляет шестьдесят процентов, а для второго и третьего этот показатель достигает восьмидесяти пяти. Поэтому, для того чтобы подобрать подходящие препараты и назначить курс лечения достаточной длительности необходимо точно определить, каким типом вируса заражен пациент.

ПЦР-исследование назначают в следующих случаях:

контакт с больным человеком, при котором могло произойти заражение;
положительный результат иммуноферментного анализа;
признаки цирроза печени: изменение размеров печени, увеличение селезенки, появление на животе подкожного венозного сплетения;
появление симптомов поражения печени: боли в правой части живота, пожелтение кожных покровов;
повышение активности АЛТ и АСТ в биохимическом анализе крови;
перед началом лечения для определения вирусной нагрузки;
с целью контроля за эффективностью антивирусной терапии;
после окончания лечения для контроля за рецидивами;
при наличии диагностированного гепатита B, для исключения смешанного поражения печени.

Расшифровкой ПЦР-анализа и иммуноферментного анализа на гепатит С должен заниматься гепатолог или инфекционист. Анализировать результаты ПЦР необходимо в комплексе с данными биохимического анализа крови, биопсии и УЗИ. Только квалифицированный врач сможет проанализировать результаты исследований и, основываясь на них, назначить правильное лечение.

В анализируемом биологическом материале обнаружен генетический материал возбудителя. Инфицирование подтверждено.

По материалам hepatit.care

Референсные значения в анализах крови на гепатит. Количественный анализ: как расшифровать анализы на гепатит С

Полимеразной цепной реакцией (ПЦР) в молекулярной биологии называют экспериментальный метод выявления вирусов. Он позволяет значительно увеличивать концентрации определенных фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в пробах биологического материала, что дает возможность их детерминировать (распознавать) и подсчитывать.

Проведение анализа выполняют следующим образом. Генетический материал (пробу крови), который потенциально может включать искомый ген, вносится в пробирку. Туда же помещают праймеры –синтезированные химическим путем отрезки небольшой длины искомого гена.

В сосуд также добавляют ДНК или РНК полимеразу, она способна выстроить цепочку нуклеиновой кислоты, которая полностью идентична первоначальной. В полученный состав вводят и набор из четырех свободных нуклеотидов – особого строительного материала для РНК или ДНК, один их которых содержит радиоактивные частицы фосфора.

Полученную смесь подогревают до 95–96°С, из-за чего две спирали ДНК, которые в обычном состоянии переплетены между собой, расплетаются. Затем препарат охлаждают, в это время праймеры сами прикрепляются к искомому участку генома вируса, не давая РНК (либо ДНК) вновь сформировать двойную спираль.

В процессе охлаждения полимераза отыскивает свободную цепочку нуклеотидов. Для функционирования данного фермента необходима именно одиночная цепь нуклеотидов. Поскольку полимераза проскальзывает по цепи ДНК (как кольцо по веревке), на двойной спирали она не способна работать.

После этого выполняют повторный цикл нагревания, из-за чего между собой разделяются цепочки нуклеотидов. При каждом из таких циклов ПЦР количество в пробе именно искомого гена гепатита возрастает в геометрической прогрессии, а остальной генетический материал продуцируется (вырастает) линейно.

После очистки раствора от остатков нуклеотидов и разделения при помощи электрофореза цепочек ДНК по параметру молекулярной массы, можно легко определить: есть ли искомый ген в исследуемом образце или нет.

Лабораторное исследование методом ПЦР позволяет получить даже больше информации, чем просто присутствие РНК вируса. Определяя параметр уровня радиоактивного излучения, есть возможность выявить, какое количество генетического материала содержалось изначально в исследуемом образце. В случае гепатита – определить показатель уровня вирусной нагрузки.

Еще одним достоинством этого метода является очень высокая степень чувствительности реакции ЦР. Она гораздо выше, чем у классических методов выявления вирусов. В идеальном варианте, для того чтобы выявить искомый ген, для ПЦР достаточно всего одного вируса в пробе.

Кроме этого, ПЦР полностью специфична. Ее праймеры создаются таким образом, чтобы они полностью соответствовали уникальным участкам искомых генов, которых нет ни у какой другой последовательности. Как уникальны отпечатки пальцев, так и в каждом гене есть уникальные последовательности из нуклеотидов.

Качественный анализ позволяет выявить только факт наличия вируса в крови. Этот тест нужно проводить для всех пациентов, у которых были обнаружены в крови антитела к гепатиту С. Его результатом может быть лишь одно значение из двух: «обнаружено» либо «не обнаружено». У здорового человека в норме (референсное значение) должно быть «не обнаружено».

Есть и специальная интерпретация таких результатов проведенного качественного исследования:

Результат «обнаружено». Это означает, что в анализируемом образце взятого биологического материала был найден фрагмент РНК, который специфичен для вируса гепатита С. Следовательно, есть факт инфицирования пациента вирусом гепатита С. Если результатом качественного ПЦР является «обнаружено», то это свидетельствует о том, что вирус размножается и в это время инфицирует в организме новые клетки печени.
Результат «не обнаружено». Такой вердикт говорит о том, что в анализируемом образце полученного биологического материала в данной лаборатории не обнаружен фрагмент РНК, который специфичен для вируса гепатита С. Либо же концентрация РНК инфекции-возбудителя в данном образце была ниже границы чувствительности теста.

В острой фазе РНК вируса гепатита С такие качественные исследования по методике ПЦР могут выявить уже спустя 1–2 недели непосредственно после инфицирования организма, то есть задолго до появления антител к самому гепатиту.

Недостоверные результаты анализов такого исследования могут быть получены при:

загрязненном биоматериале;
присутствии в крови пациента гепарина;
наличии в образце химических или белковых субстанций (ингибиторов), которые влияют на различные компоненты ПЦР.

Для проведения качественного анализа ПЦР специальной подготовки пациента к исследованию не требуется. В качестве материала используется венозная кровь.

Качественные тесты ПЦР имеют определенную степень чувствительности, и в зависимости от точности проведения исследований и уровня аппаратуры в лаборатории могут варьироваться в пределах от 10 до 500 МЕ/мл.

Это обозначает, что если вирус в пробе крови присутствует в очень малой концентрации (меньше порогового значения чувствительности данной лаборатории), то у больного пациента может быть определен результат как «не обнаружено». Из-за этого при проведении качественного анализа ПЦР с низким уровнем виремии (малой концентрацией вируса), к примеру, для больных, проходящих лечение противовирусной терапией, очень важно знать и порог чувствительности данной диагностической системы.

Для контролирования вирусологического ответа, при проведении противовирусного лечения рекомендуется использовать диагностические системы с порогом чувствительности не меньше 50 МЕ/мл. Этим критериям соответствуют, к примеру: анализаторы Cobas Ampicolor ВГС-Теst (c точностью 50 МЕ/мл), а также РеалБест РНК ВГС (с чувствительностью 15 МЕ/мл).

Согласно рекомендациям ВОЗ, для установления окончательного диагноза гепатит С, необходимо основываться лишь на основании трехкратного обнаружения РНК вируса С в пробах сыворотки крови у больного, при отсутствии других разновидностей маркеров гепатита.

Кроме методов ПЦР для выявления у пациентов РНК ВГС также применяют исследование ТМА (метод транскрипционной амплификации). Он обладает лучшим порогом чувствительности (5–10 МЕ/мл), но в нашей стране такой метод тестирования пока не очень распространен.

Такое качественное определении в сыворотке крови наличия РНК вируса гепатита С позволяет определять несколько генотипов этого вируса. В настоящее время науке известно более шести генотипов этого вируса, а также около 10 субтипов данного заболевания.

В нашей стране распространены вирусы 1, 2, 3 генотипов. Лаборатории могут выявлять следующие генотипы: 1а и 1в, 2а, 2в и 2с, а также 3, 4, 5а и 6 независимо от субтипов. Для всех модификаций вирусов специфичность определения составляет 100%.

При помощи количественного теста ПЦР определяется уровень концентрации вируса гепатита в пробах крови (вирусная нагрузка). Данный тест на виремию (концентрацию вируса) позволяет определить количество единиц определенного генетического материала (самой вирусной РНК), которую выявляют в определенном объеме. В данном случае определяют его концентрацию в 1 мл, что соответствует 1 куб. см.

Количественные параметры анализа выражаются в цифрах, для этого используют как единицы измерения международные единицы (МЕ) на миллилитр (мл), обозначающийся как МЕ/мл. Сейчас в некоторых лабораториях количество вируса может определяться и в других единицах измерения: количестве копий на мл, обозначается как копии/мл.

Сроки проведения.Для гепатита С такой количественный анализ ПЦР делают непосредственно перед началом проведения терапии. Затем на 1-й, 4-й, 12-й и 24-й неделях. Оценивание на 12-й неделе является показательным, оно позволяет определить эффективность проведения терапии.
Подготовка к анализу. Для проведения количественного анализа ПЦР специальной подготовки пациента к исследованию не требуется. За полчаса до взятия проб не следует курить. В качестве лабораторного материала используется венозная кровь.

Для разных лабораторных тест-систем существуют разные коэффициенты перевода этого показателя в МЕ/мл. В среднем берут параметр пересчета, при котором 4 копии/мл=1 МЕ/мл. То есть к примеру, если лаборатория выдает результат анализа ПЦР 2,4*10 6 копий/мл, то этот параметр нужно разделить на 4 и получим 6*10 5 МЕ/мл.

Высокой считается уровень нагрузки в 800000 МЕ/мл, это примерно соответствует показателю в 3000000 копий/мл. Низкая виремия, согласно данным некоторых авторов, соответствует параметрам количественного ПЦР ниже 400000 МЕ/мл.

В результате проведения количественного теста могут быть поставлены окончательные результаты не в виде цифрового значения, а: «ниже диапазона измерений», или же «не обнаружено».

Оценка: «ниже диапазона измерений». Это свидетельствует о том, что количественный тест не смог выявить вирусные РНК гепатита С, однако сам вирус в организме присутствует в очень малых концентрациях. Об этом говорит дополнительно проведенный качественный тест, подтверждающий сам факт присутствия вируса.
Оценка: «не обнаружено». Такой результат свидетельствует, что количественный тест не обнаружил в пробе РНК вируса.

Параметр вирусной нагрузки, прежде всего, определяет степень инфекционности болезни, уровень «заразности» больного. Чем выше у пациента показатель концентрации вируса, тем больше вероятность риска передачи его другим людям. К примеру, при половых контактах с больным человеком, либо вертикальным путем. Такой количественный показатель также помогает определить эффективность проведения лечения больного.

Проведение количественного анализа ПЦК важно для противовирусной терапии, оценивания ее успешности и планирования сроков продолжительности курса. Так, при быстром ответе организма на лечение и низкой степени виремии, срок терапии может быть и сокращен.

При медленном снижении параметра количественного ПЦР противовирусную терапию следует продлить либо модифицировать. Если уровень вирусной нагрузки низкий, то это благоприятный фактор проведения терапии, если же повышенный, то применяемый метод лечение неэффективен и следует менять препараты или методы их использования.

Качественный анализ полимеразной цепной реакции — ПЦР на гепатит С определяет наличие или отсутствие ВГС в организме. В лабораторных условиях исследуется структура РНК, в составе которой и будет находиться вирус. В случае выявления вируса С необходимо пройти курс лечения, так как запущенное состояние печени в результате приведет к тяжелым последствиям. Качественный ПЦР проводится и после выздоровления для подтверждения отсутствия антител. Назначается и для профилактического осмотра. При низкой концентрации возбудителя в крови ПЦР (качественный) может ничего не обнаружить, ведь у диагностической системы есть свои пороги чувствительности. В случае начальной стадии болезни или легкой форме проводят ПЦР ультра диагностику на сверхчувствительном оборудовании.

Термином РНК вируса гепатита С (или вирус гепатита С РНК) называется само заболевание печени. Вирус С связывается со здоровой клеткой организма, проникая внутрь. Со временем разносится по всему организму, стоит только ему попасть в кровь. В итоге возбудитель проникает в печень, сращивается с ее клетками и усиленно работает. Печеночные клетки (гепатоциты) работают под его воздействием, претерпевая изменения, и от этого гибнут. Чем дольше вирус С находится в печени, тем большее количество клеток гибнет. Со временем развиваются опасные болезни, приводящие к злокачественному перерождению и летальному исходу.

Заражение печени этой разновидностью вируса может никак не проявляться внешне. Долгие годы или десятки лет зараженный человек чувствует себя абсолютно здоровым, и только случайное обследование чаще всего и выявляет патологию. При сдаче крови на гепатит исследуется часть цепочки РНК (рибонуклеиновой кислоты), входящей в состав человеческого гена (ДНК). Результаты лабораторного исследования не стоит использовать для самолечения, ведь это только показатель. Точную картину и дальнейшую диагностику лучше определит врач.

В подтверждение ВГС назначается анализ ПЦР (полимеразная цепная реакция). Исследования ПЦР помогают найти материал возбудителя в структуре РНК и назначить эффективную терапию. Назначается в следующих случаях:

выявление признаков воспаления печени;
скрининговые исследования с целью профилактики;
обследование контактирующих людей;
диагностирование гепатитов смешанного происхождения (определение главного возбудителя);
определение уровня активности размножения вируса при хронической форме;
цирроз печени;
для определения эффективности назначенного лечения.

Исследования ПЦР назначает врач для определения эффективности курса лечения гепатита.

Существует качественный, а также количественный анализ ПЦР. Количественный ПЦР показывает процентное соотношение РНК с носителями вируса в крови, а качественный указывает на вирусное присутствие либо отсутствие. Положительный показатель качества (присутствия РНК гепатита С) нуждается и в количественном исследовании. Высокий уровень концентрации возбудителя гепатита С сопряжена с риском его передачи, то есть заражения окружающих. Низкие показатели количества лучше поддаются лечению. Количество РНК-вирусов в составе крови никак не связано с интенсивностью заболевания. Делается анализ ПЦР и в случае интерфероновой терапии, чтобы назначить продолжительность и сложность лечебного курса.

Назначается качественный анализ с показателем полимеразной цепной реакции всем пациентам, у кого в крови обнаружены антитела к гепатиту С. Кто переболел и выздоровел, должен повторно пройти тестирование. Рекомендуется сдать анализ и на гепатит В, затем, в случае положительного заключения, и на гепатит D. Также качественно анализированная реакация должна проводиться в комплексе с другими анализами крови. Анализы покажут полную картину вирусного распространения.

Из результатов теста будет виден только положительный анализ на гепатит С или же отрицательный, то есть наличие или отсутствия вируса. Если в выводе стоит «обнаружено», значит, вирус есть и продолжает активно действовать. Обозначение «не обнаружено» говорит об отсутствии вируса или его маленьком количестве. При таком показателе следует учитывать то, что аналитическая чувствительность диагностических систем разная и РНК гепатит С все же может находиться в крови, но не проявиться в анализе.

Особо чувствительный метод ПЦР ультра гепатит С выявляет даже в мизерных количествах. Используется гибридизационно-флуоресцентное исследование, которое во много раз выше, чем стандартные системы ПЦР. Метод применяют в нескольких случаях:

подозреваются скрытые формы гепатита С;
диагностика ПЦР не подтвердила возбудитель, но антитела есть;
в случае выздоровления;
для выявления ранней стадии заражения.

На окончательное решение при постановке диагноза влияет ПЦР расшифровка ВГС, в частности, при ультраметоде. Основной недостаток такого исследования — строгое соблюдение стерильных условий для образца и материалов. Небольшое отклонение иногда показывает неточные выводы аналитики, усложнит постановку диагноза и последующее лечение. Анализ ПЦР на определение РНК вируса гепатита не всегда уверенно показывает картину заболевания, иногда допускаются неточности, причем в обе стороны.

Отсутствие в результатах исследования антител JgM к РНК вирусному гепатиту С считается нормой при анализе полимеразной цепной реакции. В то же время выводы серологического анализа указывают на присутствие антител к вирусу С и это также в пределах нормы. Качественное определение не показывает интенсивность заболевания, оно только выявляет возбудитель гепатита С в РНК. Такой анализ повторяют и после лечения, чтобы подтвердить действительное выздоровление.

Если антитела JgM к РНК ВГС присутствуют, это говорит о развивающемся заражении. Заболевание при этом протекает остро или хронически, проявляется в разных стадиях. Если зафиксировано уменьшение количества антител, то анализ будет свидетельствовать о достижении результатов лечения в ходе выздоровления. Встречаются в диагностике исключительно редкие случаи ложноположительных выводов. Они обнаруживаются у женщин при беременности и у людей с другими инфекционными болезнями.

На рынке компаний по перевозке индийского лекарства от гепатита С “Sofosbuvir Express” отлично зарекомендовала себя. Данная компания успешно помогает людям излечиться от недуга больше 2-х лет. Отзывы и видео довольных пациентов вы можете посмотреть . На их счету более 4000 людей, которые выздоровели благодаря купленным препаратам. Не откладывайте свое здоровье в долгий ящик, перейдите на сайт www.sofosbuvir-express.com или позвоните по номеру 8-800-200-59-21

ПЦР (полимеразная цепная реакция) — это наиболее современный и действенный метод изучения гена вируса и его возможностей. Такая диагностика способна установить разновидность заболевания и определить его дальнейшую мутацию в организме больного.

Анализ проводится путем забора крови, которую в последующем помещают в специальные реактивы, в которых происходит клонирование клеток.

Поэтому ПЦР делится на несколько видов:

качественный анализ — распознает гены инфекция в крови. Если при проведении качественного анализа у пациента подтверждается заболевание, то следует провести количественный анализ, устанавливающий степень инфекции. В результате проведения данной диагностики специалисты пишут “обнаружено/ не обнаружено”. “Обнаружено” — говорит о том, что недуг присутствует в организме и выявлен уже его РНК. “Не обнаружено” — свидетельствует об отсутствии в пробе гена вируса, то есть РНК гепатита отсутствует. Но врачи рекомендуют провести повторное исследование через 10 дней.
количественный анализ — определяет объем генетического материала инфекции в крови. Такая диагностика помогает установить тяжесть болезни и всю клиническую историю. В результате такого анализа может быть написано только: “Положительно/Отрицательно/Недействительный”. “Положительно” — изображает инфекционную нагрузку. Доктора такой метод диагностики болезни назначают для определения действенности проводимого лечения на 4, 12, 16 и 24 неделях болезни.Если показатель вируса находится в диапазоне 8х10т МЕ/мл, то лечение эффективно, если показатели выше — то нет. “Отрицательно” — ген инфекции не обнаружен. “Недействительный” — такое бывает, если ген вируса обнаружили при качественном, но при этом не выявили при количественном анализе. Встречается подобное при условии, что объем инфекции ниже уровня.

Вирус гепатита С — диагностируется прежде всего путем проведения количественного анализа, расшифровка которого необходима для правильной интерпретации болезни. Но несмотря на это, качественный и количественный метод диагностики имеют свои отличия, например: роль и поставленные задачи перед исследованиями — качественный — подтверждает присутствие инфекции после обнаруженных антител вируса, а количественный — вторичный метод, опровергающий или подтверждающий болезнь, чтобы поставить правильный и единственный диагноз.

После проведения диагностики, интерпретировать полученный результат могут только врачи, так как он изображен должен быть не в цифрах, а в словах. Согласно статистике, . Для того чтобы понять присутствует ли в организме вирус,необходимо понимать и знать, что количественный анализ на гепатит С расшифровывается с помощью цифрового обозначения (норматива) инфекции:

Стоит отметить, что несмотря на критерии стандартов, случаются исключения, при которых врачам удавалось при результате > 2,4х10(7) МЕ/мл поставить человека на ноги. Следовательно, итог зависит и от иммунной системы человека, положительная динамика которой стала редкостью в современном мире.

Если человек здоров и его ничего не беспокоит, то итогом проведенной диагностики будет являться “не обнаружено”. А вот у тех, кто уже заболел, но при этом проводит комплексное лечение, то улучшение показателей — это сигнал к выздоровлению. К примеру, самый благоприятный диапазон вирусных рамок колеблется от 1,8х10 (2) до 2,4х10 (7) МЕ/мд, где 600 МЕ/мл — низкая концентрация, 3х10 (4) МЕ/мл — средняя, а более 8х10 (5) мЕ/Мл — уже высокая.

Вероятность ошибки возможна при том случае, если пациент не соблюдает некоторые правила проведения диагностики:

сдавать кровь натощак,
не увлекаться вредными привычками в течение 2-х дней до исследования,
не проводить УЗИ и другие подобные исследования,
не пить лекарственные средства перед сдачей анализа,
не перенапрягаться (физически),
обеспечить полноценный психологический покой.

Все это может влиять на результат исследования и делать его ошибочным. Также проведенная в разных лабораториях диагностика способна дать абсолютно различные показатели. Поэтому врачи следуют проводить контрольный количественный анализ на гепатит С в одной и той же лаборатории, но с разницей в 10 дней.

Если Вы хотите самостоятельно пройти данное исследование буду больным гепатитом С, то мы Вам все-таки рекомендуем посоветоваться с Вашим лечащим врачом, так как информативность вирусного показателя отмечается на 1,4,12 и 24 неделях болезни. Благодаря такому диапазону можно проследить эффективность или неэффективность проводимого лечения. Установить график улучшения или ухудшения состояния больного способен только лечащий врач. Поэтому доверьтесь всецело ему.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это лабораторный метод определения ДНК и РНК. Впервые он был опробован почти полвека назад американцем Кэри Муллисом. Этот сверхчувствительный анализ способен определить носителя генома по одной исходной молекуле, содержащейся в крови, слюне или коже.

Метод ПЦР имеет огромные перспективы, находит применение не только в медицине, но и в генной инженерии, и в криминалистике. С его помощью клонируют и создают новые виды ДНК, определяют степень родства. По кусочку эпителия, найденного на месте преступления, устанавливают преступника.

Почему необходим анализ ПЦР при подозрении на гепатит С, что это такое?

Вирус гепатита С – РНК содержащий вирус, имеет 6 генотипов и до 500 субтипов. Из всех гепатитов этот вирус обладает самой высокой мутационной способностью и преодолевает защитный барьер иммунной системы. Из общего числа заболевших гепатитами, вирус С стал причиной 70% случаев хронической формы и 30% цирроза и рака печени.

Для справки! Диагностика гепатита С, опасного вирусного заболевания печени, стала возможной после внедрения в клиническую практику анализов с помощью ПЦР. До этого времени вирус оставался «невидимым» для исследователей, не реагируя на обычные методы определения инфекции.

Суть способа: часть исследуемого гена с помощью специальных ферментов и условий заставляют размножаться в пробирке. Анализ ПЦР позволяет определить штамм вируса, без которого невозможно провести результативное лечение: каждый генотип по-разному чувствителен к антивирусным препаратам. Применяется два типа ПЦР:

Противовирусная терапия нуждается в постоянном контроле, чтобы своевременно скорректировать лечение, для этих целей также используется полимеразная цепная реакция.

ПЦР качественный на гепатит С дает ответ: есть ли в крови пациента штамм вируса С и какой именно. Генотипирование необходимо для уточнения диагноза, прогноза заболевания и определения сроков лечения.

По принятой классификации ген обозначается числом, а подтип маленькой латинской буквой.

Расшифровка таблицы генотипов вируса С:

Генотип 1а, 1b, 1с
Генотип 2а, 2b, 2с, 2 d
Генотип 3а, 3b, 3с, 3d, 3e, 3f
Генотип 4а, 4b, 4с, 4d, 4e, 4f, 4g, 4 h, 4 i, 4 j
Генотип 5 а
Генотип 6 а

Самые распространенные генотипы 1,2,3. В России чаще всего встречаются 1а, 1b, 2 и 3 штаммы вируса С.

Генотип вируса 1b труднее других поддается лечению, в 90% переходит в хроническую форму, из которых 30% перерождаются в рак или цирроз печени.

Генотипы 2а и 3а имеют степень хронизации 33-50 %, более отзывчивы на противовирусную терапию.

При подтверждении присутствия вируса проводится ПЦР количественный на гепатит С, с помощью которого рассчитывают количество молекул РНК, находящихся в лабораторном образце больного.

Качественный ПЦР анализ имеет два ответа:

ПЦР отрицательный означает, что возбудитель в образцах крови не обнаружен.
Положительный ответ свидетельствует об обратном: обнаружены РНК того или иного генотипа вируса С.

Вероятность достоверности результата равна 95%. Остальные 5% — это ошибка по вине человека. Такая возможность допускается из-за высоких требований к проведению исследования:

правил хранения реактивов;
соответствующей квалификации медперсонала;
чистоты биоматериала.

Сам набор ПЦР имеет 100% диагностическую точность.

Количественный ПЦР РНК гепатита С позволяет определить вирусную нагрузку на организм больного. С его помощью:

уточняется стадия заболевания (острая, хроническая);
определяется эффективность противовирусного лечения;
выясняется необходимость биопсии печени.

В некоторых случаях больной не ощущает никаких признаков болезни, в то время как методом ПЦР установлено инфицирование ВГС. Это означает, что заболевание находится на ранней стадии развития либо в хронической форме. Для уточнения диагноза необходимы дополнительные исследования, для скорейшего начала противовирусного лечения.

Вирусная нагрузка показывает активность печеночного вируса, насколько активно происходит его размножение.

ПЦР количественный гепатита С измеряется в Международных Единицах на 1 мл или МЕ/мл, что означает, сколько в 1 мл исследуемой крови обнаружено копий рибонуклеиновой кислоты определенного штамма вируса С.

Анализ на вирусную нагрузку позволяет определить наличие вирусных РНК в концентрации 50 МЕ/мл. Вирусная нагрузка в норме – это когда ПЦР не обнаружено ни одной молекулы РНК ВГС.

Таблица вирусной нагрузки:

низкая – концентрация от 600 МЕ/мл 3*104 МЕ/мл;
средняя – концентрация от 3*104 МЕ/мл до 8*105МЕмл;
высокая – уровень более 8*105 МЕ/мл.

– это сигнал, что терапевтическое лечение подобрано правильно, и прогноз на излечение от гепатита С – благоприятный.

Высокая концентрация вирусных клеток свидетельствует, что болезнь находится в острой фазе. Кровь пациента является опасным источником инфекции.

Вирусная нагрузка, показатели которой находятся на среднем уровне, характеризует либо хроническую стадию ГВС, либо может иметь два тренда развития: к ее повышению или понижению.

Внимание! Количественное тестирование проводится на протяжении всей антивирусной терапии: через 4, 12 и 24 недели, цель которой – снизить вирусную нагрузку.

По ее окончании – через 6 месяцев делается контрольная ПЦР.

Для справки! Пройти диагностику на гепатит С или любое другое инфекционное заболевание можно по направлению врача или самостоятельно.

Поводом для беспокойства должны стать следующие симптомы:

общая слабость;
изменение цвета кожи, глазных склер, выделений;
тошнота;
снижение аппетита;
боли в мышцах и суставах;
тяжесть в правом подреберье;
повышенный уровень в крови АСТ и АЛТ.

При контакте с инфицированными больными, в предоперационный период, при гемодиализе также рекомендовано обследование.

Государственные клиники делают анализ крови на ПЦР бесплатно, если имеется направление от инфекциониста или гепатолога.

Платные услуги по ПЦР диагностике оказывают во всех крупных российских городах. Стоимость зависит от типа теста, имеющегося оборудования, сроков проведения и других факторов.

Качественный ПЦР анализ в Москве и С-Петербурге обойдется от 600 до 900 руб. В регионах – от 300 до 800 руб.

Определение вирусной нагрузки гепатита С будет стоить 17000-22000 руб. Для прочих видов инфекции цена количественного исследования: 1200-10000 руб.

В чем преимущества метода полимеразной цепной реакции перед другими диагностическими способами?

Широкий спектр применения . С помощью ПЦР, используя типовое оборудование, можно определить любой вирус.
Точность определения возбудителя . Применяя различные комбинации ферментов и технику проведения анализа, достигается 100% спецификация исследования для обозначенной инфекции.
Высокая чувствительность . Методика позволяет выявить присутствие в крови одной молекулы вируса.
Оперативность . Качественный анализ бывает готов через несколько часов, количественный – через двое суток.
Диагностика вируса в инкубационном периоде. При ПЦР возбудитель определяется не по наличию антител, когда уже имеется иммунная реакция организма, а до начала патологического процесса, что облегчает лечение.

Недостатки ПЦР являются следствием ее достоинств:

для чистоты анализа требуется высочайшая степень чистоты , в том числе воздуха в лаборатории, чтобы «чужие» ДНК не попали в исследуемый образец;
высокие требования к персоналу , осуществляющему забор и анализ биоматериала.

Полимеразная цепная реакция (сокращенно — ПЦР) — один из самых современных методов определения гепатита С в крови. Анализ ПЦР на гепатит С позволяет не только выявить болезнь, но еще и определить ее стадию, вне зависимости от срока заражения. Таким образом, вы будете осведомлены не только о наличии вируса, но и о степени развития болезни.

Антитела, присутствующие в крови человека, даже профессиональному врачу заметить непросто, особенно если их концентрация мала. Достоинство полимеразной цепной реакции состоит в том, что данная методика вычисляет вирус даже на самых ранних стадиях развития. Среди преимуществ этой методики диагностирования врачи особенно отмечают следующие:

она считается одной из самых точных, позволяет вычислить даже малую концентрацию антител в крови;
ПЦР-анализ показывает результаты даже спустя 7–8 дней после заражения, в отличие от общего и биохимического анализа крови;
для проведения необходима лишь кровь пациента, а значит, отпадает необходимость добывать ткани печени, как при другой эффективной методике диагностирования — биопсии;
по РНК вируса можно не только поставить точный диагноз, но еще и определить его стадию.

С помощью современных методик врачам удалось изучить РНК вируса гепатита С. При подозрении на такой диагноз специалисту необходимо взять кровь и провести качественный и количественный анализ ПЦР РНК вируса. Нужно понимать, в чем отличие между качественным и количественным анализом.

С помощью первого варианта удается поставить диагноз, а благодаря второму определяется стадия болезни. Так, если в крови присутствует РНК вируса, можно сказать, что человек страдает от гепатита. Однако лишь количественная диагностика поможет определить, когда произошло заражение и какое лечение подойдет человеку в данном случае.

Сама болезнь считается крайне коварной, ведь она может развиваться без видимых симптомов. Именно поэтому врачи всегда проводят лабораторную диагностику, изучая кровь, а также мочу и иногда кал пациента.

Если и после полимеразной цепной реакции остаются сомнения в правильности поставленного диагноза, врач будет вынужден прибегнуть к биопсии печени. Эта методика подразумевает забор печеночной ткани с помощью специальной иглы и ее тщательной изучение.

Обнаружение РНК гепатита С в крови — дело не самое простое, поскольку здесь важна внимательность и опытность врача. Часто специалисту не удается заметить малую концентрацию вируса, из-за чего ставится ложноотрицательный результат. Кстати, такой ложный диагноз не является редкостью. По каким еще причинам он может оказаться неправильным:

Если кровь забиралась в неподобающих условиях.
Прием «Гепарина» пациентом в большинстве случаев приводит к ложным результатам исследования.
Попадание в биологический материал веществ из окружающей среды тоже может обернуться постановкой ложного положительного диагноза.

Именно поэтому забор крови нужно осуществлять осторожно и внимательно. При таком исследовании никаких особых мер соблюдать не нужно. Обычно врачи рекомендуют избегать приема большого количества медикаментов перед проведением анализа и отказ от алкоголя непосредственно перед исследованием.

При помощи ПЦР гепатит С не всегда удается выявить. Несмотря на точность этой методики, она дает результаты лишь спустя неделю после заражения. Если же проводить диагностирование раньше, велик риск получения отрицательного результата.

Если врачу удается обнаружить антитела даже в минимальной концентрации, то ставится положительный результат. Для его подтверждения врач может взять кровь на биохимический анализ. При наличии антител гепатита С биохимический анализ должен показать повышение билирубина в крови и присутствие ферментов АСТ и АЛТ.

Если по результатам ПЦР вирус есть, а остальные анализы показывают его отсутствие, врач может направить человека на биопсию. Данное заболевание считается крайне опасным и коварным, поэтому от гепатолога требуется максимальная точность.

Если у пациента не обнаружено РНК вируса, он может вздохнуть свободно. Однако если полимеразная цепная реакция дала положительный результат, врачу придется сделать еще и количественный анализ.

Расскажем, что такое количественный анализ крови при гепатите. Его смысл в том, что врач определяет концентрацию вируса в крови. Чем выше эта концентрация, тем опаснее и запущеннее заболевание.

Как расшифровывается такой анализ:

При гепатите С ПЦР отрицательный может быть показан из-за индивидуальных особенностей организма человека. Так, если человек принял большое количество лекарств перед сдачей анализов или использует гормональные препараты, результаты могут оказаться неточными. Особой трактовки требуют анализы, взятые у женщины, которая находится на первом триместре беременности. В таком случае ПЦР анализ может показать слишком большую концентрацию вируса.

Все эти нюансы должны учитываться при диагностике гепатита. Хороший врач может заметить антитела даже в небольшой концентрации и поставить диагноз.

При гепатите В, А ПЦР диагностика обычно не проводится. Это исследование актуально именно для болезни группы С.

С помощью анализа можно определить антитела даже в малой концентрации на ранней стадии развития проблемы. Однако ПЦР диагностику на гепатит С должен проводить исключительно опытный врач, обладающий достаточной квалификацией для правильной трактовки результатов.

По материалам caspian72.ru